LNAME对匹罗卡品致痫大鼠痫性活动的影响.pdfVIP

中文 摘 要 前 言 近几年来，国内外不少学者对一氧化氮(NO)在癫痈的发生 发展过程中的作用进行了研究，但内源性NO在癫痛中的作用及 其机理尚无一致结论，存在着较大的争议。众所周知，谷氨酸 (Glu)作为脑内主要兴奋性递质，在癫痈发生、扩散和癫痛活动的 保持中起重要作用。其离子型受体N一甲基一D一天冬氨酸(NM- DA)受体广泛分布于中枢神经系统，参与神经元的兴奋性突触传 递和突触的可塑性，以及突触的长时程增强。研究发现，在Glu受 体激动剂刺激下的神经元其环磷酸鸟昔(cGMP)并不升高，而其 他细胞中cGMP水平升高，提示Glu和cGMP中间存在一个中介 物质，以后的实验发现，NMDA受体活化确实导致生成一种易变物 质，被证实为NO或含NO物质，并进而使细胞内cGMP水平升高。 可以看出，NMDA受体、N0,cGMP系统在中枢神经系统兴奋过程 中具有重要功能。 NMDA受体活化后触发了许多生理效应，重要的是激活了脑 内一氧化氮合酶(NOS)，引起NO合成增加，NO以逆行方式很快 弥散到邻近星形细胞和突触前终端，通过激活可溶性鸟昔酸环化 酶(GCA)使靶细胞内cGMP水平增高，从而调节离子通道和Glu 释放，增强NMDA受体活性 ;NO对NMDA受体也可发挥负反馈 调节作用，表现出NO在中枢神经系统的神经毒性作用和神经保 护作用。因此，从这个角度来说，NO在癫痛发生、发展中可作为 一种内源性的促痈物质或抗痈物质。由于NO的半衰期极短，其 定量研究非常困难，因此对NO作用的研究多利用NOS抑制剂进 今伊究使用非选择性O“S抑制剂一“硝基精氨酸甲醋(-“ NAME)对匹罗卡品致痈大鼠进行事先处置，观察其对匹罗卡品致 痛大鼠痛性活动的影响，并用免疫组织化学方法研究大鼠海马结 构NOS的改变，探讨NO在癫痛中的可能作用。 材 料 与 方 法 、健康、雄性Wistar大鼠55只，体重180一25鲍。随机分成6 组:A组，空白对照组;B组，L一NAME+匹罗卡品(200mg/kg)组; C组，生理盐水+匹罗卡品(200mg/kg)组;;D组，L一NAME+匹罗 卡品(300mg/kg)组;E组，生理盐水+匹罗卡品(300mg/kg)组;以 上各组观察3小时后处死;F组，生理盐水+匹罗卡品(300mg/ kg)组，痈性发作3天后处死。采用匹罗卡品致痛大鼠模型，观察 L一NAME对匹罗卡品致痛大鼠痛性活动的影响，并用免疫组织化 学方法研究大鼠海马结构神经元型NOS(NOS,)及诱导型NOS (NOS,)的分布及变化。 实 验 结 果 1.L一NAME对匹罗卡品致痛大鼠痛性活动的影响。A组即 对照组动物无痛性发作;B组15例大鼠在注射匹罗卡品后有14 例很快达到癫痛持续状态，1例达到nI级发作，在3小时的观察期 限结束时有11例死亡;C组(同B组相对照)10例大鼠痛性发作 均在nI级以下，无1例达到癫痛持续状态，无死亡;D组10只大鼠 . 在注射匹罗卡品后迅速达到癫痛持续状态(平均11分钟)，并在 90分钟内全部死亡;;E组中有3例达到癫痛持续状态，其中1例在 3小时的观察期限内死亡;;F组有2例达到癫痛持续状态，其中1 例死亡。 2.免疫组织化学NOS,、NOS，免疫阳性细胞的分布及变化:A 组即空白对照组，NOS,,NOS:免疫阳性细胞散在分布于海马结构 各区，但NOS,的表达明显少于NOS,,NOS，的表达以齿状回为显 著，NOS,的表达以CA,,CA2,CA,区为显著;B组与C组相比较，B 组NOS,,NOS:免疫阳性细胞数均明显少于C组，二者之间有显著 差异(P0.01);C,E两组分别与对照A组相比，NOS,,NOS:免疫 阳性神经元数均明显增多，存在显著差异(P0.01)，且NOS:阳 性神经元增加更为明显;;E组与C组相比，NOS,,NOS:免疫阳性 神经元数明显增多，二者之间存在显著差异(P0.01);F组与E 组相比，二者NOS，阳性神经元存在显著差异(P0.01)，而NOS, 免疫阳性神经元二者之间无显著差异(P0.05)。 3.海马组织HE染色形态学观察:空白对照组及B,C和E组 海马组织未见明显损害性改变。F组动物海马区有组织损伤坏死 改变。