FHIT基因与骨肉瘤相关性的研究.pdfVIP

中 文 摘 要 前 盲 定位于3p14.2的FHIT(fragilehistidinetriad)基因被认为是 一个重要的候选抑癌基因，在许多肿瘤组织或肿瘤细胞株中F:T 基因呈现多发的、广泛的缺失。近年来在有多J中瘤发生的研究中， 寻找抑癌基因成为一大热点。细胞遗传学表明，染色体3p夕p和 13q是肿瘤的高频缺失革，由于在染色体3p14.2区段既存在3号 染色体和8号染色体的易位，又存在脆弱位点F1RA3B，因此许多 学者把研究的注意力集中在这个特殊的染色体区段。1996年， Ohta等利用外显子捕获方法首次克隆了一个新的人类基因，该基 因跨越人类染色体脆弱位点FRA3B，并含有编码组氛酸三联体的 功能区，故命名为脆性组氛酸三联体(rfagilehistidinetriad,FHIT) 基因。它是第一个将脆弱位点与肿瘤联系起来的分子学证据。 一 骨肉瘤是最常见的原发于骨组织的恶性肿瘤，居骨恶性肿瘤 的第一位，恶性度高，5年生存率仅为17%一2096。 骨肉瘤的发生、发展及演变是一个涉及多阶段的复杂过程，其 分子机制至今尚不十分清楚。了解骨肉瘤发生发展的分子机制是 开展骨肉瘤基因诊断和基因治疗的前提。骨肉瘤中重要的相关基 因，尤其抑癌基因的研究意义更大，它将有助于寻找骨肉瘤基因诊 断和基因治疗的靶基因，为骨肉瘤的早期诊断和治疗开辟新的途 径。 徽卫星多态标记PCR将遗传标记和PCR技术有机地结合起 来，应用微卫星多态分析可以同时检查出遗传标记的杂和性丢失 (Lossofheterozygosiyt,LOH)和徽卫星不稳定性(Microsatellitein- stabiliyt,MI)，提示遗传标记内或附近的肿瘤抑制基因的异常。 ·1· 目前，该技术已成为研究抑痛基因的重要方法之一。本研究选择 FHTT基因内3个微卫星多态标记对20例骨肉瘤进行杂合性丢失 (LOH)和微卫星不稳定(MI)分析，探讨FHIT基因在骨肉瘤发生 中的作用，从而有助于揭示骨肉瘤的发病机制，开辟基因诊治的新 途径。本研究检测到骨肉瘤中存在较高的杂合性丢失率，在某位 点出现微卫星不稳定频率也较高，进一步的研究将有助于提示 FHTr基因与骨肉瘤的关系。 材料 和方法 20例骨肉瘤标本来自中国医科大学第一、三临床学院骨外 科，术后迅速置液氮内冷冻，然后贮存于一700C深冻冰箱中。我 们有目的选择了三个微卫星多态标记，其中两个标记D3S1300和 D3S4103靠近第五外显子，D3S4103靠近第八外显子。我们应用 徽卫星多态标记分析方法对这三个标记进行LOH和MI的检测。 实验 结果 在20例骨肉瘤标本中，LOH的总发生率为35%，其中在 D3S1300、D3S4103和D3S1234的LOH发生率分别为27.8%、 2590、2090。MI总发生率为3090，三个位点的MI发生率分别为 22.2%,12.5%,13.390。其中4例在2个位点同时表现LOH, 2例在2个位点同时出现MI,2例在2个位点表现LOH，在另一位 点表现MI,1例在1个位点表现LOH，在另二个位点表现MI,1例 在I个位点表现LAM，在另一个位点表现MI, 讨 论 一植着分子生物学的迅猛发展，人们发现肿痛是体细胞异常增 殖的结果，是涉及痛基因激活和肿瘤抑制基因的多个基因改变的 多阶段过程。 }ty基因由10个外显子组成，既包括3号染色体和8号染 色体的易位，又包含脆性位点FRA ，在许多肿瘤组织或肿瘤细 胞株中FRrr基因呈现多发的、广泛的缺失，显示该基因异常可能 与肿瘤的发生有关，并可能是一个新的抑瘤基因。目前国内尚无 有关FHrT基因在骨肉瘤中表达的报道。 骨肉瘤是最常见的原发于骨组织的恶性肿瘤，占骨恶性肿瘤 的第一位，其特点是瘤细胞能直接生成骨样或瘤样骨组织，骨肉瘤 大多数发生于10-20岁之间，恶性度高，目前尚缺乏有效治疗手 段。外科手术后大多数在5-9个月内出现肺转移，预后差，5年 生存率为17一2096。要想大幅度地降低疾病的死亡率，首先要做 到早期诊断，及时治疗。 本实验结果说明FH1T墓