茶尺蠖核型多角体病毒多克隆抗体的制备及检测应用.pdfVIP

第 51卷第 2期 湖 北农 业科 学 Vol|51No．2 2012年 1月 HubeiAgriculturalSciences Jan．，2012 茶尺蠖核型多角体病毒多克隆抗体的制备及检测应用 谭荣荣 ，刘明炎 ，-，龚 自明 2，洪 霓 ，毛迎新 1,2 (1．湖北省农业科学院果树茶叶研究所 ，武汉 430209；2．湖北省茶叶工程技术研究中心，武汉 430209； 3．华中农业大学国家果树脱毒种质资源室内保存中心，武汉 430070) 摘要 ：以纯化 的茶尺蠖核型多角体病毒 (Ectropisobliquanucleopolyhedrovirus，EcobNPV)作为抗原免疫大 耳 白免，获得多克隆抗体 ，Indirect—ELISA效价为 1：5l200；工作浓度分别为 EcobNPV 1：1600、兔抗血清 1：3200。用所制备的多克隆抗体对提纯的多角体进行 Western—blot分析表 明制得 的抗体对茶尺蠖核型多 角体病毒有 良好 的特异性 。应用于不 同来源茶园昆虫多角体病毒分离株的检测 ．取得 了理想的检测效 果 。 关键词 ：茶尺蠖核型多角体病毒 ；纯化 ；抗体制备 ；检测 中圈分类号：Q93—331；S476．11 文献标识码：A 文章编号：0439—8114(2012)02—0298—40 Preparation ofPolyclonalAntibody againstEctropisObliqua Nucleopolyhedrovirus and Application in VirusDetection TAN Rong_rongl,2,LIU M ing-yanL2,GONG Zi-ming1,z,HONG Ni3,MAO Ying-xin， (1．InstituteofFruitandTea，HubeiAcademyofAgculturalSciences，Wuhan430209，China；； 2。HubeiTeaEngineeringTechnologyResearch Center，Wuhan430209，China； 3．NationalIndoorConservation CenterofVirus—freeGermplasm ofFruitCrops，HuazhongAgncultural University，Wuhan，430070，China) Abstract：Polyclonalantibodywasprepared by immunizingrabbitswith purified EcobNPV；And itstiterand working con— centration was 1：51200． 1：1600 in indirectELISA．In addition．the rabbitantiserum was 1：3200．Then the antiseurm and established serologicalmethodswere used to detect purified polyhedrosis in Eetropis obliqua Prout samples in different sources．Western—blotresultsshowed thatthe antibody wasspecific to the purified polyhedrosis．Then the antiseurm wasused to detectEcobNPV in the samplescollected from differenttea gardens．Theresultshowed thatserologicalmethod could be used todetectEcobNPV quicklyand