生脉成骨胶囊促进血管生成机理研究与临床观察.pdfVIP

中文摘要 目的 研究中药生脉成骨胶囊药物皿清促进瓶管生成的作用机理，以及对 人脐静脉内皮细胞株分泌内皮素1、前列环素12和一氧化氮等血管活性 物质的影响。为生脉成骨胶囊临床用于治疗股骨头缺血性坏死，改善股 骨头血液供应提供实验依据；并通过l|i；；床观察验证生脉成骨胶囊促进坏 死股骨头及其周围血管生成的效果。从现代药理学角度阐明“瘀去则新 生脉长”的中医基础理论。 方法 在复习治疗性血管生成的研究进展和临床应用的基础之上，结合该 资助项目已经取得的阶段性成果，本博士课题分为基础实验和临床观察 两部分进行研究。 thiazolyl 基础实验：应用噻唑蓝(methyl 究生脉成骨胶囊药物血清对体外培养的人脐静脉细胞株(ECV304)增殖的 immunosorbent 影响，利用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked assay， endothelial 清中血管内皮生长因子(vascular factor，VEGF)浓度， growth 采用ELISA法检测生脉成骨胶囊药物血清作用1 12， PGl21浓度，用硝酸还原酶法检测生脉成骨胶囊药物血清作用1h和2h后， oxide，NO)浓度，应用透射电镜 ECV304细胞培养上清中一氧化氮(nitric 构。所得数据以SPSSl0．0软件进行统计分析。 l临床观察：将纳入研究的股骨头缺血性坏死患者分为单纯介入治疗 组(对照组)和中药加介入治疗组(中药组)，通过数字减影血管成像技术 substraction fdigital 股骨头及其周围血管成像，利用JVC 3-CCD彩色图像摄录输入 ky—F30B iBAS2．0全自动图像分析系统计算出治疗前 仪进行图像采集及Kontron 后的股骨头及其周围血管成像区域灰度值，并取其差值，以t检验进行 统计分析。 结果 基础实验研究显示，生脉成骨胶囊药物血清作用Ih后，低剂量组 浓度均明显升高(P0．01)，但是MTT比色法研究显示，各剂量组生脉成 殖的作用(P0．01)。生脉成骨胶囊药物血清作用1h后，高剂量组上清中 剂，量组上清中ET-1浓度升高，低、中、高剂量组上清中PGl2浓度与对 照组相比，仍显著降低(P0．05)，但低剂量组上清中PGl2浓度与中剂 量组和高剂量组相比，有显著升高(P0．05)，各剂量组NO浓度仍较高， 高剂量组(P0．051。提示各剂量组生脉成骨胶囊药物血清显著抑制 的影响表现为：低剂量组和中剂量组表现升高趋势，高剂量组药物血清 表现为先抑制后促进ET-1的分泌(P0．05)。透射电镜观察可见：与阴性 对照组、中剂量组和高剂量组相比，低剂量组ECV304细胞内线粒体数 目增加，川芎嗪组ECV304细胞线粒体体积增大，基质密度明显降低， 呈肿胀状态，内膜嵴松散。各剂量组和阴性对照组ECv304细胞内线粒 体体积无明显增大，但高剂量组和中剂量组ECV304细胞内可见数量较 多、体积较大的透明空泡。 临床研究结果显示：在口服生脉成骨胶囊配合常规介入治疗2个月 后，与单纯介入治疗组相比，股骨头缺血性坏死患者的坏死股骨头及其 周围血管成像区域灰度值显著增加(尸O．05)，临床症状改善明显，患侧髋 关节Harris评分增加。 结论 基础实验研究提示，低剂量生脉成骨胶囊药物血清可促进ECv304 细胞分泌VEGF，这可能是其促进血管生成的重要作用机制，这种作甩 无明显的量效关系，而呈双相性；高、中、低剂量组生脉成骨胶囊药物 血清均显著抑制ECV304细胞分泌PGl2，从而解释了该药具有明显抗炎 镇痛作用的机理：各