人脐血造血干祖细胞体外扩增和移植SCID小鼠的实验研究.pdfVIP

人脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植SCID小鼠的实验研究 中文摘要 夕 J 摘 要 探毕以，/ 人脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植 SCID小鼠的实验研究 又厂、 ‘，‘、， ，二、，。‘、。一_，。，_一一、_ _.，.、_，二_二，、_曰__ 、丈脐血作为一种新的造血干祖‘细胞来源，可以成功地替代骨髓和 动员外周血用于临床上骨髓衰竭病人的造血重建。这己经被越来越多 的实验研究所证明。这是因为脐血中含有丰富的造血于/祖细胞: CD34CD38一细胞、集落形成细胞 (CFC)、长期培养启动细胞 (LTC- IC)的含量均高于骨髓和动员外周血。另外脐血移植后移植物抗宿主 疾病(GVHD)的发生率和严重程度也比骨髓和动员外周血细胞移植 低。但是由于单份脐带血中所含有的造血细胞数量较少，限制了脐血 移植的应用，目前脐血移植主要用于儿童和低体重成人患者。为了扩 大脐血移植的应用范围，首先必须对脐血造血干/祖细胞进行体外扩 增，这也是目前移植领域中倍受关注并急需解决的课题之一汁- 近年来陆续发现了几种新的造血生长因子如FL,TPO,包CF等， 并己证明它们在早期造血调控中发挥着重要作用。因此我们参考国内 外新的方法并加以改进，在原有实验结果的基础上，采用细胞因子组 合FL+TPO+SCF+IL-6来扩增脐血造血细胞，通过无基质细胞接触的 液体悬浮培养、细胞表型动态测定、体外集落形成试验等方法探讨了 这一因子组合对脐血CD34细胞的体外扩增效应，发现与经典的细胞 因子组合 (SCF+IL-3+IL-6十GM-CSF十EPO)相比，该扩增方案能更 有效扩增CD34+细胞，在产生了相当数量的较成熟细胞的同时，能在 较长时间 (至少4周)内仍保持一定比例的造血干细胞成分。 为了进一步了解扩增后细胞的移植能力和造血潜能，我们以严重 联合免疫缺陷((SCID)小鼠作为脐血移植的动物模型，将扩增后的脐血 造血细胞通过尾静脉注入受亚致死量辐照的SCID小鼠体内，无菌饲 养4周后取其骨髓细胞，通过人CD45细‘胞的流式细胞仪检测和Alu 生些全续乡干/祖细胞体外扩增和移植SCIDJ鼠的实验研究 中文摘要 基因的PCR检测，在小鼠体内均发现了人源细胞，表明了扩增后的 脐血造血细胞可以长期植入 SCID小鼠体内，从而改善或重建其造血 功能。 关键词:人脐血;造血干/祖细胞;体外扩增; 亚致死量照 射:SCID小鼠; 人脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植SLID小鼠的实验秘究 英文摘要 Abstract TheexperimentalstudyofengraftmentinSCID miceafterexvivoexpansionofhumanumbilical cordbloodhematopoieticstem/progenitorcells Umbilicalcordblood(UCB)isanalternativesourcetobone marrow(BM)andmobilizedperipheralblood(MPB)ofhematopoietic stem/progenitorcells.ManystudieshavedemonstratedthatUCBhasbeen usedsuccessfullyforhematopoieticreconstitutioninpediatricpatientsand lowweightadultswhoareinbonemarrowfailure.Ithasbeenshownthat UCBcontainsabundanthematopoieticstem/progenitorcells,thecontentof CD34CD38-andthenumbersofcolonyformingcellsandlo