外周血单个核细胞hTERT基因表达对肺癌诊断的意义.pdfVIP

外周血单个核细胞hTERT基因表达对肺癌诊断的意义.pdf

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中文摘要 前 言 肺癌是发病率和死亡率增长最快的,对人类健康和生命威胁最大的恶 性肿瘤。世界上每年因为肺癌死亡的人口约90多万人,居各种恶性肿瘤之 首,然而我们临床工作中,经常面临肺部病灶其性质难确定,而痰中查找肿 瘤细胞及病理活检又有一定的难度,因而要求一种有效、简便的诊断方法。 端粒酶可作为一种肿瘤标记物已在多组研究中被证实。端粒酶有三部分组 成,hTERT是端粒酶的催化亚单位(反转录酶),在端粒酶的表达中起限速 作用,是一种RNA酶,在细胞的永生化过程中伴有hTERT的表达和端粒酶 活性的上调,hTERT的表达水平可以反映端粒酶的活性高低。多组研究证 实hTERT在癌变的早期已有表达,且与肿瘤的发生有密切关系。而且其表 达不仅存在于组织中,外周血也同样存在表达,本研究检测了31例肺癌和 18例良性肺部病变患者及1 达。以期提高肺癌诊断的水平和提供一种简便的方法。 实验对象 随机选取2003年6月至10月在中国医科大学第二临床医院住院肺癌 及良性肺部病灶患者49例,并根据最终临床、生化、病理诊断分为肺癌组与 良性肺部病灶组。良性肺部疾病组:18例,男8例,女10例,年龄14-86 实验材料 试剂与实验仪器: 淋巴细胞分离液; KNA Extractioll 总RNA提取系统(II)(total SystemII购于华美生物工 ·l· 程公司); RT-PCR试割盒(大连宝生物蠢限公司); PCR仪(BIOME骶U型); 毫泳铰为:羚y¥一lII33A整; 1D Kadak成像分析系统; 紫努凝荻扫描议;离心撬。 实验方法 1、标本静采集 2、总RNA的提取 3、弓|物酌设计、会成、缝讫 4、eDNA合成 5、癍参黧定量PCR 6、统计学处理 霜SPSS lO.0统计软件包进行单因素的方差分析与方差的齐佳梭验, 谭价统计学显著性,数据均以均数4-标准差表示。 结 果 恶性组,良性组,健康组的外周血单个核细胞hTERT表达水平见表1 (以均数±标准差表示)。恶性组与良性组耽较宥燕著穗差异(pO.001), 恶性组与健康组比较有显著性差异(PO.001)良性组与健康人组比较无 照著性差异(PO.05)。 表1:各组外周血PMBCs hTERT表达水平 ·2· 结 论 1、肺癌患者外周盎肇个核细胞检测端粒酶hTERT基霹表达永平是一 种较为可靠的诊断肺癌的方法。 2、它斡定量稔测对肺癌酶诊断具裔较高的特异凌和灵敏度。 3、此项基因表达指标可以做为肺瘸的一种新的肿瘤标记物。 关键词:hTERT;静癌;诊断 ·3· hTERT in cancer ofPBMCs The value activitylung diagnostic Preface increased has and ofthe canc

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