利用双向电泳构建并优化超数排卵犊牛卵泡液蛋白质图谱.pdfVIP

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2017-09-05 发布于内蒙古
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利用双向电泳构建并优化超数排卵犊牛卵泡液蛋白质图谱.pdf

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广东农业科学 2013年第 14期 l23 利用双向电泳构建并优化超数排卵犊牛卵泡液蛋白质图谱赵海峰，张飒，陈集成，柯浩，陈东峰，陈宝剑，陆凤花，韦英明 (广西大学动物繁殖研究所，亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室．广西南宁 530004) 摘要：以2～5月龄超数排卵犊牛卯泡液为研究对象，比较不同pH值的IPG胶条和 4种上样量 (150、250、350、450 g)对卵泡液蛋白图谱构建的影响。结果表明，在 pH4-7的IPG胶条、上样量为 350 g时，获得较好质量的卵泡液蛋白图谱，并获得约 319个蛋白点。成功构建的卵泡液蛋白双向电泳技术，为进一步研究犊牛与成年牛卯泡液中差异蛋白质组学分析奠定基础。关键词：双向电泳；蛋白质组学；犊牛；卵泡液中图分类号：$823 文献标识码：A 文章编号：1004—874X(2013)14—0123—03 Proteom icmap construction and optimizationofcalffollicular fluidsbytwodimensionalgelelectrOph0resis ZHAO Hal—feng，ZHANGSa，CHENJi—ehen，KEHao，CHENDong-~ng， CHENBao-jian，LUFeng—hua，WEIYing—ming ∽nimalReproductionInsitute，GunagxiUniversity／StateKeyLaboratoryforConservationand UtilizationofSubtropicalAgro-bioresources，Nnaning530004，China) Abstract：Inordertoestabilishandoptimizeatwodimensionalgelelectrophoresis (2一DE)techniqueforproteonm analysisofcalf follicularfluid，effectsoftwodifferentIPGstripsand4kindsofloadingvolunles (150Ixg，250txg，350Ixg，450 曲onthequantyofthe 2一Dmapswerestudied．Theresultsshowedthatoneperfectandclearly2一DEmapwasobtainedwhenpH 4～7IPG stripwith24cnland loadingvolumeof350 gwereused．About319spotsinthe2-DEmapweredetectedbytheImageMaster2-Dplatinum software．Our established2-DE techniqueofcalffollicularfluidscanbeeffectivelyappliedindifferentpeoteinsbetweencalvesandadultcattles． Keywords：twodimensionalgelelectrophoresis；proteomics；calves；follicularfluid 在犊牛体外胚胎培养的过程中，犊牛卵母细胞体外牛 6头，利用FSH(Folhropin—V)超数排卵处理，每 100kg 发育能力远低于成年牛】I【卵泡液是卵母细胞生长、发育、肌肉注射 20mg，每天两次，间隔 12h，连续4dl2I。最后一成熟的微环境，其中的生物活性蛋白能够直接影响卵母次注射 24h后手术采卵。采卵当天