玉米遗传育种中抗病毒基因的转化研究_王宇.pdfVIP

生物技术 玉米遗传育种中抗病毒基因的转化研究 王  宇 （北大荒垦丰种业股份有限公司， 哈尔滨 150090 ） 摘  要 玉米病毒病广泛发生，已从起初的次要病害上升为主要病害。该病由病毒侵染所导致，目前，已报道的侵染玉米的病毒种类已达 40 多种。该病发生趋势上升迅猛，面积广泛，造成严重的损失。 关键词 玉米遗传育种； 抗病毒； 转化研究 中图分类号 S513 文献标志码 B 1 玉米的遗传转化方法 转化频率为千分之几。 1993年子房注射法首次得到使用，通过 玉米遗传转化是通过特定方式在受体细胞内导入外源基 这一方法可以获得了转Bt基因的玉米。超声波法能获得较髙的 因，使之发生定向永久的遗传变异。自农杆菌叶盘转化法被开 转化效率，但操作繁琐，而且在超声波处理过程中容易断裂。 创以来，到目前为止将外源基因导入玉米的方法如下。 2 抗病毒转基因玉米研究 1.1电击法 福摩起初将pat基因利用电击法导入玉米原生质 玉米病毒病广泛发生，已从起初的次要病害上升为主要病 体，获得愈伤组织。随着电击法的发展，还能够对幼胚、愈伤 害。该病由病毒侵染所导致，目前已报道的侵染玉米的病毒种 组织和胚性悬浮细胞系进行遗传转化。科学家利用电击法在玉 类已达40多种。该病发生趋势上升迅猛，面积广泛，造成严重 米中导入基因，获得了较大的成功。值得一提的是，电击法因 的损失。病株率大于80％。在中国，粗缩病和矮花叶病两种玉 为其操作简单，不受宿主限制的特点，在玉米遗传转化技术研 米病毒病更为常见，其中玉米矮花叶病毒（Maize Dwarf Mosaic 究之初就得到了较为广泛的应用，但是却存在效率低下和转化 virus ）分布最广，危害最严重。但是，这也推动了玉米病毒病 效果不佳的缺点。 的研究。研究结果表明此病是一种虫传病害，传毒昆虫多为刺 1.2农杆菌介导法 在目前繁多的转基因植物中，五分之四都 吸式口器，主要有灰飞虱、叶蝉等。以下简要对近年来开展的 是由农杆菌介导所转化的。随着载体系统和转化方法的改进，农 玉米抗病毒基因工程加以论述。 杆菌介导这一遗传转化不再像过去那样仅局限于双子叶植物，现 自1986年烟草花叶病毒的外壳蛋白被人导人烟草，获得第 在，在一些单子叶植物身上也获得了较大的成功，例如水稻和玉 一列抗TMV 的转基因植株以来，多种植物抗病毒基因工程策略 米等农作物。农杆菌介导的遗传转化技术属于纯生物学的范畴， 得到发展。就玉米矮花叶病抗病基因工程研究而言，整个基因 和DNA直接导入法相比而言，其精巧的转基因系统具有明显的优 组仅有一个阅读框架，编码一个大的多聚蛋白。玉米矮花叶病 点，例如转化的频率更高，对大片段的DNA的导入，导入基因的 毒主要由蚜虫以非持久性方式传播，其中需要两种病毒编码的 拷贝数低，发生转基因沉 默的概率低，表达效果较好。 蛋白，即CP和Hc-pro （辅助成分蛋白酶）。同时，该病毒还能 1.3 基因枪法 自1987年火药式基因枪发明以来，玉米的遗传 经过种子进行传播，机械传播效率也较高。 转化得到了不错的发展。这种方法也就是利用髙速金属粒子， 培育抗病品种是防治玉米矮花叶病毒（MDMV ）病害发生 在植物的细胞、组织以及器官中导入外源基因，不受受体基因 的有效途径。但玉米自身具有抗性基因，难以分离和利用，这 限制，同时也能避开原生质体再生的障碍。在物理参数、环境 就使人们利用玉米矮花叶病的抗性基因培育抗病品种有了一定 条件以及生物因子的技术被优化以来，基因枪转化技术在玉米 的阻碍。植物病毒为了完成自身的繁殖和侵染这一过程，主要 遗传转化中得到最为广泛的应用，能实现对包括原生质体、悬 依赖于寄主