脂肪酸合成酶抑制剂C75对日本脑炎病毒感染力的影响_葛玲玲.docVIP

中 国 兽 医 科 学 　２０１４，４（６）：７６－５８２ Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｅｔｅｒｎａｒｙ　ｃｅｎｃｅ 中图分类号 ：Ｓ　５２．５９． 　文献标志码 ：Ａ　文章编号 ：１６７３－４６９６（０１４）６－０５７６－０７ 脂肪酸合成酶抑制剂 Ｃ７５对日本脑炎病毒 感染力的影响 葛玲玲１，李佳容１，李　晨２＊ ，茅　翔１＊ （ ．南 京 农 业 大 学 动 物 医 学 院 ，江 苏 南 京 　２１００９５； ２．滨 州 医 学 院 代 谢 与 神 经 疾 病 研 究 所 ，山 东 滨 州 　２５６６０３） 　 　摘要 ：为 初 步 探 究 宿 主 细 胞 脂 肪 酸 合 成 酶（ ＡＳＮ）在 日 本 脑 炎 病 毒（ＥＶ）感 染 细 胞 过 程 中 的 作 用 机 制 ， 采用 ＦＡＳＮ 的 特 异 性 酶 活 性 抑 制 剂 Ｃ７５ 进 行 体 外 和 体 内 试 验 ，观 察 其 对 病 毒 感 染 力 的 影 响 。 分 别 以 不 同 浓 度 的 Ｃ７５（ 、０、０μｍｏｌＬ）作 用 细 胞 ，通 过 噬 斑 试 验 检 测 病 毒 量 ，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ 检 测 Ｅ 蛋 白 的 表 达 量 ， Ｑ－ＰＣＲ 检 测 病 毒 ＮＳ１ ｍＲＮＡ 的 表 达 水 平 ，激 光 共 聚 焦 试 验 观 察 病 毒 蛋 白 与 ＦＡＳＮ 的 位 置 关 系 ，体 内 抗 病 毒试 验 验 证 Ｃ７５ 的 抗 病 毒 效 果 。 结 果 显 示 ，在 体 内 、外 试 验 中 Ｃ７５ 抑 制 ＦＡＳＮ 酶 活 性 后 ，ＥＶ 的 感 染 量 均 下 降 ； ＡＳＮ 与ＪＥＶ 的 ＮＳ３ ＮＳ５ 蛋 白 以 及 病 毒 ＲＮＡ 均 存 在 共 定 位 现 象 。 结 果 表 明 ， ＡＳＮ 在ＪＥＶ 感 染 时 起 重 要 作 用 ，且 Ｃ７５ 在 体 内 外 均 具 有 抗ＪＥＶ 感 染 的 作 用 。 关键词 ：日 本 脑 炎 病 毒 ；脂 肪 酸 合 成 酶 ；７５；抗 病 毒 活 性 Ｉｎｆｕｅｎｃｅｏ ａｔｙ　ｃｄ ｙｎｔｈａｓｅｉｎｈｉｂｉｏｒ　７５ｏｎ ｈｅｉｎｆｅｃｔｖｅ ａｂｉｉｙ　ｆ ａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｔｓｖ ｕｓ ＧＥ　ｉｎｇ－ｌｎｇ ，ＩＪａ－ｒｏｎｇ ，Ｉ　ｈｅｎ ，ＭＡＯ　ｉｎｇ （ ．ｏｌｅｇｅ　ｆ　ｅｔｒｉｎａｒｙ　ｅｄｉｃｉｎｅ Ｎａｎｊｉｎｇ　ｇｒｉｃｕｌｕｒａｌ　ｎｉｖｅｒｓｔｙ Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，ｈｉｎａ； ２．ｎｓｉｕｔ 　ｏｒ　ｅｔａｂｏｌｃ　ｎｄ　ｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ　ｉｏｒｄｅｒｓ，ｉｎｚｈｏｕ　ｅｄｉｃａｌ　ｎｉｖｅｒｓｔｙ，ｉｎｚｈｏｕ２５６６０３，ｈｉｎａ） 　 　Ａｂｓｒａｃｔ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｆｕｎｃｔｏｎａｌｒｏｌｅｏｆｆａｔｙａｃｄｓｙｎｔｈａｓｅ ＦＡＳＮ）ｄｕｒｎｇＪａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｔｓ ｖｉｕｓ（ＥＶ）ｉｎｆｅｃｔｏｎ，７５ ｗｈｉｈｉ ａｓｐｅｃｆｃｉｎｈｉｂｉｏｒｏ　 ＡＳＮ ｗａｓ　ｓｅｄｔ　ｘｐｌｏｒｅｉｓｅ ｅｃｔｓｏｎ　ＥＶ　ｎ－ ｉ ｉ ｖｔ ａ ｉ ｖ ｃ ｌ ｗ ｔ ｗｔ Ｃ ０ １ ２ ／ ｉ ｏ ｖｒ ｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ　ｙ　ｌａｑｕｅ ｓｓａｙ，ｉａｌ　　ｒｏｔｅｎ　ｘｐｒｅｓｓｏｎ　ａｓｅｘａｍｉｎｅｄ　ｙ　 ｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ，ｉａｌ　Ｓ１ｍＲＮＡ ｌｅｖｅｌ　ａｓ　ｅａｓｕｒｅｄ　ｙ Ｑ－ＰＣＲａｎｄｔｈｅｃｏｌｏｃａｌｚａｔｏｎｂｅｔｗｅｅｎＦＡＳＮ ａｎｄｖｉａｌｐｒｏｔｅｎｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙ ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｉｒｏｓｃｏｐｙ．Ｔｈｅａｎｔｖｒａ　ｆｅｃ　ｆ　７５ｗａｓａｓ　ｅｒｆｅｄ　ｎ ｉｖｏ．ｎ　ｅｓｕｌ，ＥＶ　ｒｏｄｕｃｉｎ　ａｓｉｎｈｉｂｔｅｄ ａｔｅｒ ｈｅｉｎｈｉｂｔｏｎ　ｆ　ＡＳＮ　ｃｉｉｙ　ｉｈ　７５，ｎｄ　ＡＳＮ　ｏｏｃａｉｅｄ　ｉｈ　ＥＶ　Ｓ３ ＮＳ５ａｎｄ　ｉａ　ＮＡ．ｎ　ｕｍ－ ｍａｒｙ，ＡＳＮ　ｌｙｓａｎｉｍｐｏｒａｎｔｒｌｉｎ　ＥＶ　ｎｆｃｉｎ　ｎｄ　７５ｃａｎ ｎｈｉｂｔＪＥＶ　ｎｆｃｉｎ　ｏｔｈ　ｎ　 ｒｏ　ｎｄ　ｎ ｉｖｏ． Ｋｅｙ　ｏｒｄｓ：Ｊａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｔｓｖｒｕｓ；ａｔｙ　ｃｄ　ｙｎｔｈａｓｅ；７５；ｎｔｖｉａｌ ｃｔｖｉｙ  　 　 日 本 脑 炎 病 毒 （ａｐａｎｅｓｅｅｎｃｅｐｈａｌｔｓｖｉｕｓ， ＪＥＶ）又 称 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 ，属 于 黄 病 毒 科 （ｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）、黄 病 毒 属 （ｌａｖｉｖｉｒｕｓ），为 单 股 正 链 ＲＮＡ 病 毒 。 病 毒 ＲＮＡ 只 有 一 个 开 放 阅 读 框 （ＯＲＦ），编