大黄栀子对大肠杆菌体外抑菌活性的研究.pdfVIP

大黄栀子对大肠杆菌体外抑菌活性的研究 姚四新王宪文郑玉妹王丽荣张丹孙勇 摘要：面对当今细菌对抗生素泛滥的耐药性，中药不断走入人们的视线。它的低耐药及低残留是其重要优势，因此研 究中药在养殖业中的应用及价值是非常有必要的。本试验采用琼脂扩散的方法，用不同浓度梯度中药对大肠杆菌进行 抑菌性试验。结果显示：单独栀子的抑菌作用不明显；不同浓度的大黄抑菌效果差异很大，大黄对大肠杆菌的最佳抑 大黄对大肠杆菌有显著抑菌效果，栀子对大肠杆菌体外的抑菌活性不显著，当栀子3n)：o．1259／ml大黄后抑菌活性明显 增强。 关键词：大肠杆菌，栀子，大黄，抑茵试验 前言 中药的应用有着悠久的历史和丰富的应用经验，在中医上的应用以得到了世界的认可。中兽医同 样有着宽阔的发展领域及前途。随着人们生活水平的提高，对肉蛋奶质量的要求也越来越高。瘦肉精、 抗生素等药物残留的报道不断出现，严重影响了我国畜牧业的发展和人类的健康。近年来，病原性细 菌的耐药性有逐年增加的趋势，抗生素的残留已经成为影响食品安全的重要因素之一，而中药恰恰有 着低耐药低残留的特点。为此我们参考了中药有效成分提取分离技术[1—3]及中兽医学f4—7]等资料，用 栀子和大黄采用煎煮的方法提取其有效成分，在体外对大肠杆菌进行抑制性实验，得出了一些结果， 希望能为大肠杆菌病的控制和治疗有所帮助。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1试验菌株：大肠杆菌(来源于动科学院预防兽医实验室)。 1．1．2中药：栀子509、大黄509(购于佐今明药业有限公司) 1．2方法 I．2．1中药有效成分的提取 采用水煎法[7】，用天平称取栀子50g，适当处理后后用纱布包起来放入烧杯中，加一定量的蒸馏 水，使液面埋过药物。浸泡10min，进行加热，沸腾后，计时20rain，滤过，收集滤液；继续熬制浓 缩至50 ml，使药液浓度为生药l g／ml，高压灭菌后放入冰箱内备用。用同样的方法制取大黄提取物。 0．1259／ml、0．06259／ml、0．03t259／ml，然后分别盛放入已灭菌的小瓶中。 1．2．2大黄及栀子抑菌活性的测定 在无菌操作台内，用灭菌环挑取适当大肠杆菌菌落，接种于营养琼脂培养基上，均匀涂布，然后 用打孔器在接种后的培养基上打4～6个孔，并做好标记， 1．2．3．1栀子抑菌活性的测定 用微型移液器吸取30u】的不同浓度栀子提取物滴于相应的圆孔内，在培养箱中培养12小时后， 测量抑菌圈的大小。 1．2．3．2栀子+125mg／ml大黄抑菌活性的测定 提取物滴于每一个孔内，放入培养箱中培养12小时后，测量抑菌圈的大小。 2结果 2．1大黄及栀子抑菌结果见下表1及图l 表1体外抑菌试验结果统计(mm) 浓度(g／m1) 大黄 大黄(0．125)+栀子a 0．5 l7．90士O．7 13．7圭O．72 O．25 13．40a：O．4 12．2士O．66 466 0．125 9．53士O．2 10．4士1．08 0．0625 3．67±03 11．8士1．13 O．03125 0．00 l 3．8i-0．95 生理盐水 0．00 0．00 图l体外抑菌试验折线图 药敏结果判断标准： 抑菌圈直径§mm为不敏感；6～10 mm为低度敏感；10b14mm为中度敏感；14mm以上为高