针刺对实验性糖尿病大鼠心肌组织内趋化因子-1表达影响的研究.pdfVIP

针刺对实验性糖尿病大鼠心肌组织内趋化因子-1 表达 影响的研究 王洪峰 陈新华 王守鹏 (长春中医药大学, 长春 130117) [摘 要] 目的：通过观察针刺对实验性糖尿病性大鼠心肌组织趋化因子-1(MCP-1) 表达影响的研究，进一步探讨针刺在治疗糖尿病性心肌病（DCM ）方面的作用 和效果。方法：选用48 只健康 Wistar 雄性大鼠按体重随机分为对照组 8 只，实 验性糖尿病（DM ）模型制作组 40 只，通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ），诱导 DM 大鼠模型。将确定为 DM 的 34 只大鼠随机分为 3 组，即模型组 11 只、依那 普利治疗组 11 只、针刺治疗组 12 只。针刺治疗组选肺俞、脾俞、肾俞、三阴交、 内关、胃管下俞，每日针刺 1 次，每次 15min，连续针刺 12 周；依那普利治疗 组每日灌服依那普利 1.5mg/kg。检测大鼠空腹血糖水平；对大鼠体重进行前后对 比；14 周末，HE 染色光镜下观察心肌组织；免疫组化染色观察心肌组织 MCP-1 蛋白的表达水平。结果：治疗后，针刺组大鼠 FBG 较治疗前显著下降（P0.01 ）， 明显改善DM 大鼠的一般状态；针刺组和依那普利药物治疗对照组的 MCP-1 在 心肌内表达从染色强度到面积比DCM 模型组均明显减轻，半定量分析结果表明， 针刺组的 MCP-1 蛋白表达接近于对照组，针刺组与依那普利阳性对照组心肌组 织单核巨噬细胞浸润明显降低，分别与 DCM 模型组比较，均具有显著性统计学 意义(P ＜0.01)，两组之间比较，针刺组优于依那普利阳性对照组。结论：针刺可 明显改善实验性DCM 大鼠心肌病理组织，对 DCM 心肌具有一定的保护作用， 较明显的抑制 DCM 大鼠心肌 MCP-1 蛋白表达的作用。心肌组织 MCP-1 蛋白参 与了 DCM 发病过程，提示针刺防治 DCM 的作用可能是通过抑制心肌组织 MCP-1 途径，减少 MCP-1 过度表达，抑制 DCM 炎症发病机制有关。 [关键词] 针刺；实验性糖尿病性心肌病（DCM ）；MCP-1 糖尿病性心肌病（DCM ）是指糖尿病患者心肌细胞原发性损伤引起广泛的 结构异常，最终导致左心室肥厚、舒张期和(或)收缩期功能障碍的一种疾病，其 主要病理改变是心肌毛细血管基底膜增厚，细胞外基质集聚，心肌发生纤维化等。 MCP-1 在心肌的炎症反应中对炎症细胞的趋化及激活起到了重要作用，是 DCM 发病关键。本实验通过对实验性糖尿病性心肌病大鼠心肌组织中 MCP-1 的表达 474 研究，揭示针刺改善实验性糖尿病性心肌病大鼠 MCP-1 作用原理及针刺对实验 型糖尿病性心肌病大鼠心肌组织的治疗作用。 1 材料和方法 1.1 材料 实验动物选取 8 周龄雄性Wistar 大鼠48 只( 由吉林大学医学部动物实验中心 提供) ，体重 180～220g 。依那普利（扬子江制药股份有限公司）；链脲佐菌素（美 国 Sigma 公司）；枸椽酸二钠、枸椽酸三钠，75%乙醇（北京化工厂）；血糖高灵 敏度试剂盒（长春汇力生物工程技术开发中心）； Tanon GIS-1000 凝胶图像处理 系统(上海) ；OlymPus 光学显微镜( 日本) ；毫针（华佗牌，规格：0.25*25mm 苏 州医疗用品厂有限公司）；北京怡成血糖仪(JPS-5) ；日立7150 型生化自动分析仪 （日本），精密电子天平。 1.2 模型制作方法 大鼠适应性喂养 7 天后，禁食不禁水 12h，无不良状况，全部列入观察，按 体重随机分为 2 组，即对照组 8 只，DM 模型制作组 40 只。单次腹腔注射 STZ 55mg/kg （临用前用0.1mol/L 枸橼酸缓冲液溶解，pH4.2 ，以 0.2um 微孔滤膜除 菌过滤后，置冰浴下使用）于模型制作组大鼠，对照组腹腔注射等体积上述缓冲 液。注射 STZ 72h 后，剪尾尖采血测空腹血糖，血糖≥16.7mmol/L，尿糖（+ + + ） 以上者，共34 只列入 DM 观察对象，造模成功率 85%。 1.3 分组及治疗方法 将确定为 DM 大鼠(34 只)随机分为 3 组 DM ，模型组 11 只、依那普利治疗 组 11 只、针刺治疗组 12 只。对照组