Trx-Gcthionin融合蛋白酸切割过程的内源荧光研究.docVIP

第３０卷，第１１期 ２ ０ １ ０年ｌ １月  光谱学与光谱分析 Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ  ＂Ｃ０１．３０，Ｎｏ．１１，ｐｐ３２７—３２８ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２０１０  Ｔｒｘ－Ｇｃｔｈｉｏｎｉｎ融合蛋白酸切割过程的内源荧光研究  杨树维，陈  锐，周俊峰，冯  娟一，任正隆  电子科技大学生命科学与技术学院，四川成都６１００５４ 摘要本文采用稳态荧光光谱学手段研究了硫氧还蛋白融合的Ｇｃｔｈｉｏｎｉｎ在酸切割过程中内源荧光的变 化，发现在ｐＨｉ６．８中性缓冲体系中，当激发波长为２６０或２８０ ｎｌｎ时，融合蛋白中酪氨酸和色氨酸的荧光 均有贡献。当向体系中加入ＨＣＩ，调节ｐＨ至１．４时，酪氨酸在３０５ ｎｒｎ的荧光发射明显增强，而Ｔｒｐ的荧光 强度变化不大。随着酸处理时间的延长，色氨酸的磷光发射逐渐增强，而Ｔｒｐ的Ａ一无明显变化。而当体系 ｐＨ值调至中性后，Ｔｒｐ的荧光发射占主导地位。上述现象表明，酸诱导融合蛋白中Ｔｙｒ局部微环境发生变 化，导致Ｔｙｒ－－Ｔｒｐ的能量传递效率降低。至于酸处理后Ｔｒｐ磷光增强的现象可能与目标蛋白的释放和二硫 键远离有关。 关键词融合蛋白；酸切割；内源荧光 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－０５９３（２０１０）１１－０３２７－０２  众所周知，在基因工程中常采用硫氧还蛋白（Ｔｒｘ）作为