真核生物基因工程的遗传学基础.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 3(4): 32-371981 1414一}}-ti 真核生物基因工程的遗传学基础 ）‘ 朱 立 煌 （中国科学院遗传研究所，北京） 基因工程作为一个新的研究领域问世尚不 在个体发育过程中正确地表达的问题，以及通 足十年，但它在深度和广度上发展得非常迅速。 过复杂的世代交替稳定传代的问题，就更为复 概括地说，基因工程研究的范畴有3个，它们彼 杂了。 如果从这个角度来看待基因工程技术， 此独立而又有联系。第一，基因工程以其独特 那么可以说今天的基因工程技术还刚刚处在初 的整套技术和方法渗透到分子遗传学基础研究 创阶段。本文正是想从这个角度来综合一下真 的各个领域，使分子遗传学进人一个新的时代， 核生物基因工程业已取得的进展，并且探讨其 有人称之为新遗传学。它的特点是人们可以从 进一步发展的遗传学基础。 细胞中取出个别基因，在试管内予以各种操作， 然后再输回到另外的活细胞中进行基因结构和 一、历史和现状 功能的研究。分子生物学家的活动舞台因而大 基因工程技术的核心是纯系增殖即克隆化 大扩展了，新的现象一再发现，诸如基因的跨 (clonning)。从方法论的角度来看，这是一个 叠，不连续性，乃至在发育过程中基因的移动， 全新的概念，专指一段 DNA在与运载体DNA 它们一次又一次地冲击传统的基因观念，甚至 分子重组后，依赖运载体的复制能力在宿主细 在基因DNA与蛋白质的关系上一个经典的概 胞中扩增的技术过程。它与 donning这个词在 念— 核昔酸顺序与氨基酸顺序的共线性关 以前被赋予的其他含义迥然不同。纯系增殖的 系，也不再是普遍适用的。在这种形势下，对基 第一个实验是在 1972年完成的，当时应用了三 因的实质和 DNA的功能有必要从理论上进行 项重要技术：(1)用内切酶和连接酶剪切和重 新的探讨，由Crick等人掀起的一场关于 DNA 组不同来源的 DNA分子；(2）用琼脂糖凝胶 自私性的 (S（elfish)辩论，正是这种趋势的反映。 电泳检测重组分子；(3）重组分子作为复制子 第二，基因工程作为一门新兴工业的基础，应用 转化大肠杆菌。纵观以上三项，毋庸分析即可 范围日益广阔。当前目标主要是生产各种医用 看出，纯系增殖的成功在一开始就是微生物遗 和工业用的蛋白质，现在已有几个成功的报告。 传学和生物化学的结合。 限制性内切酶的分 而从长远来看，它也是基因治疗和改良动植物 离、鉴定和应用则是基因工程得以诞生的第一 品种的应用基础。第三，基因工程技术本身的完 推动力。乍一看这是一项生化研究的成果，实 善和发展也己成为分子生物学基础研究的新范 际上发现它的基础恰恰是微生物遗传学中对宿 畴。这个范畴有很多研究课题，如探索和改建 主控制的限制和修饰系统的长期研究的结果。 各种更为安全或适合于不同用途的运载体和宿 主系统，研究如何使外源基因更好地适应宿主 ZhuLihuang:GeneticBasisofGeneEngineering in 细胞，保持稳定地复制，正确甚至高效地表达。 Eucaryot 但对基因工程技术来说，最艰巨的莫过于将外 1)本文是作者于198。年9月在全国 “分子遗传学和基因 工程科研工作会议”上所作的报告，曾经盛祖嘉、吴昊 源基因输人高等动植物的细胞。至于外源基因 同志审阅，特致谢忱。 ． 32 D,}iNwAf 限制性内 机械修剪 合成的双 直接 切酶消化 链 cDNA 化学合成 连接到 加同聚多核 由限制酶形成 平端连接