山葡萄CBF1基因的克隆及其表达载体的构建.pdfVIP

第 3期 (总第346期) 农产品加工 (学刊) No．3 2014年 3月 AcademicPeriodicalofFarmProductsProcessing Mfdr． 文章编号：1671—9646 (2014)03a一0045—03 山葡萄 CBF1基因的克隆及其表达载体的构建 ’ ’， 刘’’ 厍、 (长春职业技术学院，吉林 长春 130033) 摘要：CBF1转录激活因子是一类受低温诱导的反式作用因子 ，能有效提高植物抗低温的能力。以抗寒性较强的长白 山野生山葡萄 (耐一40℃低温)为材料，通过RT-PCR方法成功地克隆低温诱导转录因子CBF1基因，并构建花椰菜 花叶病毒CaMV35S启动子调控下的CBF1融合基因表达载体，为下一步转化农作物、利用CBF1基因综合改良农作物 抗逆性提供了物质基础。 关键词：山葡萄；CBF1转录因子；克隆；表达载体 中图分类号：Q943．2 文献标志码：A doi：10．3969／jissn．1671—9646(X)．2014．03．015 CloningofTranscriptionFactorCBF1of VitisAmurensisand ConstructionofPlnatExpressionVector LIU Yang (ChangchunVocationalInstituteofTechnology，Changchun，Jilin130033，China) Abstract：CBF1transcriptionactivatorisonekindoftransfactors，whichisinducedbycold，andimproveeffectivelylow toleranceability (一40℃ tolerance) ．TheexperimentusedwildAmurensiscomefrom Changbaishanasmaterialand successfullyclonedthertanscriptionfactorCBF1genebyamplifyingthrough method ofRT-PCR．AndconstructedhteCBF1 geneplantexpressvectorsregulatesby 35S promote，which would establish materialbasefortransforminghtecropsand utilizingCBF1genetosyntheticallyimprovecropstolerance． Keywords：VitisAmurensis；CBF1transcriptionfactor；clone；expressionvector 当前 ，随着农业生态环境的不断恶化 ，低温 、 Rupr．)；烟草品种 NC89，大肠杆菌 E．coliDH5Ot， 干旱及高盐环境严重威胁着现代化农业的发展。尤 表达质粒 pBI121，吉林农业大学生命科学院产品； 其是我国东北和西北的农作物冻害发生普遍，因冻 克 隆载体为 pMD18一Tvector，TaqDNA 聚合 酶 、 害所造成的损失也十分严重。因此，对植物抗寒分 T4DNA连接酶 、限制性 内切酶等工具酶 ，Trizol 子生物学与基因工程的研究，成为国际植物分子生 Reagat，上海生工生物工程公司产品。 物学研究领域的一个前沿 内容，并且取得了重要进 1．2 引物设计与合成 展。研究者们发现，CBF (CRT—bindingfactor)转录 根据山葡萄转录因子CBF基因序列设计一对特 因子参与调控拟南芥 COR15a (CO