抗D-二聚体单克隆抗体的制备和鉴定论文.pdfVIP

摘要 研究目的：血栓性疾病已经成为临床上十分常见的疾病，严重威胁着 ． 人类的生命健康，近年来其发病率渐增且发病年龄呈年轻化之势，成为当 代国内外医学界研究的热点和重点之一。制备出具有效价高、纯度高、特 异性强、无交叉反应、重复性好以及可无限量生产等多项优点的抗D一二 聚体单克隆抗体，可以使血栓性疾病的早期诊断、抗体导向血栓显像和抗 体导向溶栓等更加快速、准确、简便。 方法：本实验以人源性D一二聚体标准品作为抗原常规免疫BALB／c 雌鼠，取免疫小鼠的脾细胞与同系骨髓瘤细胞sP2／0作电融合，HAT选择 培养出杂交瘤细胞。以D一二聚体标准品为抗原，间接ELISA法筛选出分 泌抗D一二聚体抗体的杂交瘤细胞，有限稀释克隆化培养获得稳定分泌抗 tern D·二聚体单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株。利用ELISA、Wes blotting等方法鉴定抗D一二聚体单克隆抗体的特性。 +结果：研究筛选出2株稳定分泌抗D一二聚体的单克隆抗体杂交瘤细 胞株，分别命名为6A3和8A9。2株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为 blott tern IgG2a．通过ELISA、Wesing等方法的鉴定，抗D一二聚体单 克隆抗体能与D-二聚体发生特异性反应。 结论：本实验成功制备出亲和力强、效价高，并且能特异性识别D一 二聚体的单克隆抗体，将为血栓性疾病的诊疗发挥重要作用。 关键词：血栓性疾病；D一二聚体；单克隆抗体 andIdentificationofMonoclonal Preparation Antibodyagainst 伊-diIF i aI i I i ni caI I d Specty：C i i CS aboratoryagnost Author：YunLi N i Tutor：Yongng Abstract ic diseasesare commoninelinical Objective：Thrombot very disease， andthreat tohumanhealthsetious tsmorbidiandmot i ly；i ty tal ty areon ofvariousdi til1 increasin top seases，S ing recent years and become in t hasbecomeone youngeraverageage．I ofresearch andhot inthemodernmedicine prioritiesspots the anti-