AOZ化学发光酶联免疫检测试剂盒的研制.pdfVIP

第26卷第 4期 济南大学学报 (自然科学版) Vo1．26NO．4 2012年 lO月 JOURNALOFUNIVERSITY OFJINAN (Sei．andTech． 0ct．20l2 文章编号：1671—3559(2012)04—0366一o4 AOZ化学发光酶联免疫检测试剂盒的研制 郑峻峰 ，张 峰 ，吕 丽 (1．大连海洋大学 水产与生命学院；2．辽宁省海洋生物资源恢复生境修复重点实验室，辽宁 大连 116023) 摘 要：以呋喃唑酮代谢物(AOZ)和卵清蛋 白(OVA)偶联物为包被抗原，与AOZ样品或标准品竞争呋喃唑酮多克隆抗 体，加入辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔抗体(IgG)，研制AOZ的化学发光酶联免疫检测试剂盒。以鲁米诺一过氧化氢为 发光底物进行化学发光酶联免疫检测。结果表明：试剂盒分析灵敏度为0．005 g／L，比传统的ELISA试剂盒高出一个数量 级，拥有更低的检测限，批内变异系数为2．1％～7．9％，批间变异系数为5．2％ ～9．5％，批内回收率为93％～113％，批间回收 率为94％一110％。与呋喃西林代谢物(SEM)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)及呋喃妥因代谢物(AHD)之间无明显交叉反应。此 试剂盒可用于水产品中AOZ的检测。 关键词：呋喃唑酮代谢物；化学发光酶联免疫检测；试剂盒 中图分类号：s948 文献标志码：A PreparationofAnAOZ Chemiluminescence-ELISA Kit ZHENGJun-feng，ZHANGFeng一，L0Li (1．CollegeofFisheriesandLifeScience，DalianOceanUniversity；2．KeyLaboratoryofMarine Bior·esourcesRestorationandHabitatReparationinLiaoningProvince，Dalian116023，China) Abstract：TakingAOZ—VOA asenvelopedantigen，whichcompeteswithAOZsamplesorstandardAOZ togetfurazolidonepoly— clonalantibody，andjoiningHRPtolabelIgG．achemiluminescsences—ELISAkitf0rthemonitoringofAOZresidueisdeveloped．Tests ofchemiluminescsence—ELISA takingluminol—H2O2assubstrateshow thatthesensitivityoftheAOZCL-ELISA kitis0．005 L，one orderhigherthanthatofconventionalELISAkits，andhas alowerdetectionlimit．andthattheinterCV iS2．1％ 一7．9％ ．theintraCV 5．2％ 一9．5％ ．．theinteranalyticalreeovery93％ ～l13％ ．andtheintraanalyticalrecovery94％ ～l10％ ．Thiskithasnovisiblecross reactionwithSEM ．AM0ZandAHD．SOitcanbeusedtodetectAOZ inaquaticproducts． Keywords：A0Z；chemiluminescence—ELISA：kit 呋喃唑酮作为杀菌剂被广泛应用于水产养殖 多 I4，多家公司都开发了AOZ的ELISA检测试剂 业，在水生生物体 内经过代谢形成呋喃唑酮代谢物 盒，酶联免疫检测技术逐步走向成熟。化学发光酶 (AOZ)，危害人们的健康 ¨，因此各国对水