中草药醇提物及水提取物对大肠杆菌体外抑菌活性的比较研究.pdfVIP

传播，对人类的生命健康构成威胁。因此，设法寻 肠杆菌(鸡源)、E犬 大肠杆菌(犬源)、8号大肠 究 求抑制大肠杆菌的耐药性迫在眉睫fl-3]。 杆菌(猪源)、E1R大肠杆菌(鸡源)均为临床分离 牛耳大黄、黄芩、金银花、黄连、虎杖等上百 的多重耐药致病性大肠杆菌。由吉林农业大学药 种中草药均具有一定的抑菌作用 ，因此，本实验 理实验室惠存。各菌株对临床常用抗生素的耐药 拟采用平皿二倍稀释法对藿香、玄参、牛耳大黄、 情况见表 1。 表 1 六种抗生素对动物源性大肠杆菌最低抑菌浓度(MIC)的测定(g．Mr1) 中兽医学亲旗 2009年第3期(总148期) 1．2 药品及试剂 培养。 酵母粉，蛋白胨，氯化钠，琼脂粉，无水乙醇，甘 2。4 菌落计数 油等均为国产分析纯试剂．藿香、玄参、夏枯草、 采用常规方法进行菌落计数，根据记数结果 牛耳大黄、凤尾草、茵陈、白花蛇舌草、苦参、虎 将菌液稀释到 5xl05／mL 杖、赤芍均购 自吉林大药房。 2．5 平ml-倍稀释法测定 1O种中草药不同提 1．3 主要仪器 取方法对大肠杆菌的MIC值 KQ一250DV数控超声波提取器(昆山市超声 将单味中草药提取液用液体LB培养稀释成 仪器有限公司)。EYELA一旋转蒸发仪(日本)，数 5个浓度 ，含药液浓度分别为 lg／mL、0．5g／mL、 显恒温水浴锅(金坛市丹阳门石英玻璃厂)，电热 o．25v／mL、0．125g／mL、0．0625g／mL，药品与无菌、溶 恒温培养箱(湖北省黄石市医疗器械厂)，高速低 化的营养琼脂(温度约为40-50~C)分别按 1：4的 温离心机(德国)，LDZX一50KBS立式电热压力蒸 比例加入灭菌平皿中，使药物最终浓度分别为： 汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)，电热恒温鼓风 o．2g／~、0．1g／ml、0，05g／ml、0．025g／ml，0．0125g／mlo 干燥箱 (上海精密实验设备有限公司)，SW—CJ一 药物加入琼脂中后，立即在平皿充分混匀，待平 1F超净工作台(苏州净化设备有限公司)。 皿中琼脂凝固后将其划分为平均的6等份，根据 2 方法 菌落计数结果，将幼龄菌液稀释成在 5xl04— 2．1 中药提取液的制备 105CFU／ml范围内的浓度，取幼龄菌液 10M1，分 2．1．1 中草药醇提取掖的制备 别加入不同浓度的药物培养基中，用L棒涂匀， 分别称取将粉碎后的10种草药各 20g，经 置37aI=温箱中培养 14h后，观察细菌生长情况， 200mL80％乙醇常温浸没24h在 30℃超声波提 计算 l0种中草药的MIC值。 取器中提取30rain,共提取3次，合并三次提取液． 3 结果与讨论 用旋转蒸发仪 37c=《减压浓缩至药液中生药浓度