小麦籽粒萌发期多酚氧化酶活性的变化规律.pdfVIP

江苏农业科学 2009年第6期 小麦籽粒萌发期多酚氧化酶活性的变化规律 陈 军 ，高贵珍 ，王 静 ，马传喜 (1．宿州学院，安徽宿州 234000；2．安徽省宿州市墉桥区农业委员会 ，安徽宿州 234000 3．安徽农业大学农学院，安徽合肥 230036) 摘要：通过对 7个小麦品种萌发期多酚氧化酶(PPO)活性测定分析，结果表明，7个小麦品种资源中，PPO活性变 化范围在 3O．60～70．20U／(g·min)之间，平均值为49．40U／(g·min)，小麦籽粒萌发过程中PPO活性是不稳定的， 小麦籽粒萌发过程中成熟干籽粒(0h)PPO活性最低；萌发过程中不同品种的PPO活性的变异系数有一定差异 ；小麦 籽粒萌发过程中品种和萌发期对PPO活性都有显著影响。 关键词：小麦；多酚氧化酶；活性 中图分类号：$512．101 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2009)06—0125—02 面制食品是我国人 民的主食，而在面制食品的加工和储 19、邯郸6172、连麦 2号7个小麦品种，于 2007--2008年度种 藏过程中经常会出现褐变现象，有不少研究表明，小麦中多酚 植于宿州市农业科学研究所试验 田，采用小区撒播种植 ，田问 氧化酶 (polyphenoloxidase，PPO)是 引起 褐 变 的主要 原 管理与大 田一致。 因 -31。PPO是一类广泛分布于植物体内能催化多酚类氧化 1．2 试验方法 成醌类的质体金属酶。PPO的底物 (酚类物质)存在于液泡 1．2．1 样品处理 (1)每个品种称取相同质量的2l份，每 中，这种酶与底物的区域分布，使得PPO在完整细胞 内的生 份 1．00g。(2)将上述样品浸于 1个培养皿里，于25℃、空气 理功能难 以确定。生物体内的PPO分布是不均匀的，具有时 湿度95％的人工可编程气候箱 内培养，定时翻麦。(3)萌发 间和空间特异性。在小麦中，从幼苗到植株和成熟籽粒都含 期分7个阶段即0、12、24、36、48、60、72h(即每隔 12h取样 1 有多酚氧化酶，但其种类及活性有所差异。在不同的小麦品 次)，将培养好的小麦籽粒冰浴研碎备用。 种中，红皮小麦活性较高，白皮次之；硬粒小麦的PPO活性远 1．2．2 粗酶液的提取 酶液的提取按Kruger等 的方法进 低于普通小麦 。在籽粒成熟过程中，胚乳中的酶活性是 行，作了部分修改。(1)取研碎备用样品，加 10ml缓冲液，于 逐步降低的 。。成熟籽粒中的PPO主要存在于种皮，面粉 4℃浸泡 12h。(2)4℃下 10000r／min离心 15min，取上清 中的PPO活性随出粉率增加而增加 。PPO由内到外依次 液置于提前准备好的冰箱内保存备用(短期)。 增多，总含量低于发育过程中幼嫩籽粒。也有人认为，这是因 1．2．3 PPO活性检测 PPO活性检测按Kurger等 的方法 为PPO与籽粒里的其他蛋 白质结合，以非活性状态存在所 进行，作了部分修改。在 比色皿中依次加入2．8ml磷酸缓冲 致，浸泡后，籽粒的活性高于面粉，说明PPO存在于籽粒表 液，1ml0．1mol／L邻苯二酚。用移液管加入0．3ml粗酶液， 皮处 。 混匀，迅速放人37℃水浴锅中，水浴5min后测D 。每克 小麦籽粒PPO活性的高低对小麦面粉及面粉基食品在 籽粒每分钟吸光值上升0．001定义为 1个酶活单位 (U)，即 加工和储藏过程中的色泽品质影响较大… 。国内外许多育 PPO的单位活性吸光度表示为U／(g·min)。 种专家已对面粉色泽品质改 良进行了一些研究，取得了一些 1．3 数据分析 进展。但小麦籽粒萌发过程中PPO动态性的变化规律还不 运用Excel和 SAS统计分析程序对数据进行分