中国番茄黄化曲叶病毒小环状DNA分子的发现与证实.pdfVIP

第45 卷 第 5 期 2000 年3 月 简 报 中国番茄黄化曲叶病毒小环状DNA 分子的 发现与证实 殷勤燕 张 颖 张玉满 刘玉乐 * 张忠泽 田 波 ( 中国科学院微生物研究所分子病毒室, 北京100080 中国人民解放军军需大学微生物室, 长春 130062 中国科学院应用生态研究所微生物室, 沈阳110015. *联系人, Email: liuyl@sun.im.ac.cn) 摘要 番茄黄化曲叶病毒为一Begomovirus 联体病毒. 在中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI) 中 发现并证实了与TYLCV-CHI 有关的一些小环状 DNA 分子的存在. 这些小环状DNA 分子的大 小为TYLCV-CHI DNA A 全长基因组的一半, 1.2 1.4 kb 左右. 序列分析表明, 这些小分子序列 中间均有一段未知来源的DNA 片段插入. 分子杂交证实这些未知来源的DNA 片段既不与DNA A 同源也不与DNA B 同源, 可能是病毒DNA 与植物DNA 重组后形成的. 不同的小环状 DNA 分 子有不同的未知序列插入, 但它们均含有TYLCV-CHI DNA A 的大基因间隔区及部分的AC1 基 因, 然而它们并不含有完整的开放阅读框. 关键词 联体病毒 番茄黄化曲叶病毒 基因组 亚基因组 联体病毒是环状的单链DNA 病毒. 根据其基因的结构及寄主范围, 联体病毒分为 3 个亚 组 亚组 Mastreviruses , 亚组 (Curtoviruses), 亚组 (Begomoviruses) [1]. Begomoviruses 是一组粉虱传播的侵染双子叶植物的双组分或单组分DNA 联体病毒. 双组分 DNA 联体病毒 基因组有 DNA A 和 DNA B, 每个基因组大小为 2.5 2.8 kb, 共编码 6 7 个开放阅读框 (ORFs). 单组份的联体病毒只有一个 2.7 kb 左右的基因组, 编码 6 个 ORFs[2]. 在联体病毒侵 染的植物中, 除了存在联体病毒的全基因组 DNA 外, 还检测到了一些小 DNA 分子. 这些小 [3] DNA 分子大小不一, 有的为病毒基因组的一半 , 有的小于病毒基因组的一半, 小 DNA 分子 的存在与病毒间的关系已引起了人们极大的兴趣. 中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)在广 西 [4] 云南 福建 吉林和黑龙江等均引起了大面积病害. 柯冲等人 首先报道了该病, 刘玉乐 等人[5]在分子水平上证明这一病毒是一个新的联体病毒. 关于 TYLCV-CHI 的基因组结构 侵染特性等均未见报道. 我们在试图扩增其全长 DNA 时, 意外地发现在TYLCV-CHI 感染的 植物中有一些与TYLCV-CHI 基因组相关的小环状DNA 分子. 1 材料与方法 ( ) 病毒来源. 番茄黄化曲叶病毒感染的烟草来源于广西省或中国科学院微生物研究 所温室, 现采病叶或 20 保存备用. ( ) 植物总DNA 的制备. 按文献[6]报道的方法提取. ( ) PCR 反应. (1) 引物: 1. 5 GGTCTTATTTATATGTGGACAC3 2.