整合素αvβ3受体靶向的MR分子探针制备及体外成像.pdfVIP

东 南大学学 · 470 · FSou Univ JSoutheastUniv眷MMeedd医‘SScc学iEE版ddij)2一0…09，’D一ec；’2一8、(6)-4…7‘0-4…73 整合素 o~v[33受体靶 向的MR分子 探针制备及体外成像 王小东，吴国球 ，居胜红。，滕皋军 ，姚玉宇 ，刘乃丰 (1．东南大学附属中大医院 心内科，江苏 南京 210009；2．东南大学附属中大医院 检验科， 江苏 南京 210009；3．东南大学附属中大医院 放射科，江苏 南京 210009) [摘要]目的：构建结缔组织生长因子多肽 (CTGFP)超微超顺磁氧化铁粒子 (USPIOs)磁共振 (MR)分子探针，以显示高表达整 合素ave3受体人肝癌Be17402细胞。方法：用免疫细胞化学方法检测Be17402细胞ave3受体表达情况；用邻苯二马来酰亚 胺(OPDM)将 USPIO和CTGFP偶联；将USPIO—CTGFP、USPIO分别与Be17402细胞孵育，同时设立多肽竞争组及对照组，行普 鲁士蓝染色显示铁颗粒，体外磁共振成像(MR1)观察在T： WI上T2弛豫时间变化。结果：Be17402细胞ave3受体表达阳性； 普鲁士蓝染色可见USPIO—CTGFP组铁颗粒分布在细胞膜，而USPIO组及竞争组细胞膜上和细胞内铁颗粒极少；体外MRI显示 USPIO—CTGFP组T2弛豫时间低于USPIO组、竞争组及对照组 (P0．05)。结论：USPIO—CTGFP对ave3受体具有较好靶向作 用，可通过MRI显示高表达整合素ave3受体Be17402细胞。 [关键词]结缔组织生长因子；多肽；分子影像学；分子探针；超微超顺磁氧化铁粒子 [中图分类号]R445．2 [文献标识码]A [文章编号]1671—6264(2009)06—0470—40 ‘ 近年来，分子影像学 已成为研究的热点，它将分子 1 材料和方法 生物学、药物化学和现代医学影像学密切结合，在细胞 和分子水平对生物学过程进行活体定性及测量…。 1．1 材料 分子影像技术的关键在于运用高特异性成像专用探 超微超顺磁氧化铁粒子 (USPIOs，东南大学生物科 针、相应的放大技术和敏感高效的图像检出系统。磁 学与医学工程学院惠赠)，人肝癌细胞株Be17402细胞 共振成像(MRI)由于其极强的成像能力及广泛的应用 (中国药科大学生命科学学院新药研发中心提供)，CTG- 前景而受到关注，多种 MR分子探针的开发成果也不 FP(上海生工生物工程技术服务有限公司合成)，胎牛血 断出现 。。 清(杭州 四季青公司)，RPMI1640(Gibco公司)，抗人 整合素cxv3[3受体在新生血管内皮细胞和一些肿瘤 av3[3抗体(RD公司)，SP试剂盒及DAB显色剂(北京 组织高表达，而正常组织不表达或低表达此受体 。 中杉金桥生物技术有限公司)，荧光倒置相差显微镜 (日 结缔组织生长因子多肽 (connectivetissuegrowthfactor 本Nikon公司)，7．0T微型MR仪(德国Broker公司)。 peptide，CTGFP)是一个人工合成的l6肽，来源于结缔 1．2 方法 组织生长因子第 4结构域 ，可 以特异性与 otv133受体 1．2．1 探针构建 将 0．1mgUSPIOs用 0．9ml 结合 (专利 申请号：200910025731．0)。研 究表明， 0．1mol·L～pH5．0醋酸钠缓冲液悬浮，加入0．1ml CTGFP与CTGF二者都可与NRK一52E细胞结合，但 0．2mol·L～2一巯基乙