牛的胚胎工程技术.pdfVIP

— ； 广 西 农 业 大 学 学 报 1992，增 刊 ：121一 124 Journal of Guang~i Agricultural Um~rcrsity 牛的胚胎工程技术 石德顺 ．；． ，7 (广西农业大学动物繁殖研究室) 胚胎工程技术是生物工程技术的一个分支，是动物繁殖学及发育生物学的一个重要 组成菲分，它的发展不仅对本学科的深入研究具有重要作用，而且对畜技生产发展，频危 动物保护均产生巨大影响。胚胎工程技术主要包括三个方面的内容。一是在个体水平上， 将胚胎与受体重组，即主要指胚胎移植；二是在细胞水平对胚胎进行切割、梭移植、卵裂球 重组 以及卵母细胞与精子的体外重组等；三是在分子水平上将特定基因导入受精卵，从而 改变个体 的性状。 胚胎工程技术 自1891年英国学者 Hoape的兔胚移植 以来，至今已有 100年的研究历 史：然而．发展最为迅速的是近二十年，特别是近十年来，许多新技术相继研究成功，并逐 步完善．向生产阶段过渡；一些较成熟的胚胎工程技术也 已由单纯的研究手段，转化为新 型的生产力，并对畜牧生产的发展起到了重要作用。本文对牛胚工程技术的发展及应用情 况作一简介。 1 胚胎移植 胚胎移植是将一头良种母牛的早期胚胎取出，移植到另一头生理状态相同的母牛体 内，使之继续发育成新的个体。它是胚胎工程技术的基础。通过胚胎移植可以充分发挥优 良母牛的繁殖潜力，迅速扩大 良种牛群，便于引种和保种，对畜牧生产的发展起着巨大作 用。同时，胚胎移植亦为生殖生理学和遗传学的进一步研究创造了条件，对此学科的发展 亦具重要作用。 牛胚胎移埴早在 50年代就 已由Willett等报道成功，然而直到 70年代才逐步应用到 畜牧业生产。目前，许多胚胎移植的商业化公司已相继在柒大利亚、加拿大、美国、新西兰 及欧洲一些国家建立，进入 了国际胚胎移植的商业化时代。我国从 70年代末期开始从事 牛胚胎移植的研究工作．80年代后发展较快，目前在一些地区亦已步入 向生产过渡的中间 试验阶段。据统计，1985～1991年间。我国已进行了3000--6000次牛的胚胎移植．成功率 在 40％左右。胚胎移植主要包括供体和受体牛的准备，胚胎的采集和移植等环节。胚胎的 采集和移植有手术法及非手术法两种。前者是一种沿用方法，由于操作麻烦且损害牛体， 已不多用。后者 自1949年Rouson和Dowling首次试验以来，经逐步改进，现已成熟，被广 泛采用。 为一次采集到较多的胚胎，以充分显示胚胎移植在提高良种母牛繁殖力中的作用，通 f 】2t 、 常要对供体牛进行超排处理。超排是在母牛发情周期的第 16d，或 5～15d注射溶黄体剂 PGF，的前两天一次注射孕马血清促性腺激素．或连续 4d注射垂俸促性腺激素，以促进 卵泡发育．增加排卵数。 胚胎冷冻保存亦是胚胎移植得以推广应用的一个重要环节。只有将胚胎冷冻保存起 来，才便于运输，防止胚胎浪费，去掉受体和洪体的发情同期化处理。因而，70年代牛胚胎 冷冻保存的成功是导致胚胎移植在畜牧生产 中得以应用的一个重要因素。目前．根据降温 速度及投人液氮前的温度．冷冻方法可分为：缓慢冷冻法．快速冷冻法，超速冷冻法及玻璃 化冷冻法四种。 2 胚胎分割 ■ 为提高胚胎的利用率．以便增加一定数量胚胎的妊娠头数 胚胎分割是一条有效途径 之一。一定阶段的胚胎，其卵裂球具有发育学上的全能性．如将其分开．各 自均发育成新的 个体．胚胎分割就是将桑椹胚或囊胚用玻璃微针切为两半，装人空透明带后，分别移植到 受体母牛体 内。 目前，胚胎分割技术已较为成熟。据美国学者Gray等的报道，二分胚的移植妊娠率达 40％一50％，从而使得每枚原胚胎可产出0．8～1头犊牛，利用率得到大大提高。我 国