急性支气管哮喘小鼠肺组织水通道蛋白1表达的变化及乙酰唑胺对水通道蛋白1表达的影响.pdfVIP

· 6 · 生坐堡 垄查 皇 ! 10月第3卷第5期 ChinJAsthma(ElectronicEdition)，0ctober2009，Vo1．3，No．5 ． 论 著 ． 急性支气管哮喘小 鼠肺组织水通道蛋 白1表达的变化 及 乙酰唑胺对水通道蛋 白1表达的影响 唐顺广 周瑞祥 贲素琴 倪松石 【摘要】 目的 通过水通道蛋 白l(aquaporins1，AQP1)在急性过敏性支气管哮喘(简称哮喘)小 鼠肺 组织表达的变化 ，以及乙酰唑胺对 AQP1表达的影响，探讨哮喘 的分子发病机制 ，为 哮喘防治提供新思路 。 方法 4O只C57BL／6小 鼠随机分为 A、B、c、D、E5组，其 中A组为磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersaline， PBS)非哮喘组、其余 4组建立哮喘模型，B组、c组、D组为乙酰唑胺干预组 (300mg／kg、200mg／kg、 100mg／kg)和哮喘对 照组 (E组)，干预组在激发阶段给予不 同剂量的乙酰唑胺腹腔 注射。5d后处死小 鼠 观察肺组织形态学改变 ；测肺湿干重 比；支气管肺泡灌洗液 的细胞总数、分类计数 以及 白介素 5(IL一5)和 7 干扰素(IFN一7)水平 ；用 RT—PCR、Westernblot和免疫组织化学及免疫荧光法检测肺组织 AQPlmRNA及 AQP1的水平和分布情况 。结果 ①哮喘对照组肺组织的湿干重 比值 比非哮喘组 明显增高(PO．05)；乙 酰唑胺干预组肺组织的湿干重 比值较哮喘对照组显著减低 (P0．05)，与剂量呈负相关；②哮喘对照组 BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数和 IL5水平均高于非哮喘组 (PO．05)，IFN7水平低于非哮喘组(P 0．05)，治疗后细胞总数 、嗜酸粒细胞数 、中性粒细胞 、淋 巴细胞均明显下降 (P0．05)，且与剂量呈正相 关 ；③哮喘对照组 AQP1在气管黏膜上皮 、微血管 内膜上皮 、支气管周 围血管床、炎症细胞呈强阳性表达 ， 其表达水平 明显高于非哮喘组(PO．O1)，使用乙酰唑胺干预后表达 明显低于哮喘对照组 (Po．05)，下 降的幅度与剂量呈正相关性 ；但 AQPlmRNA检测结果无 明显差异(Po．05)；④哮喘对照组肺组织可见 较弥漫的炎性改变 ；而乙酰唑胺干预组炎性改 变则 明显减轻。结论 ①AQP1在急性哮喘小 鼠肺组织 内 及炎症细胞上过度表达 ，哮喘组呈强阳性表达 ；② 乙酰唑胺对 AQP1有显著的抑制作用 ，可 明显改善小 鼠 肺部的炎性细胞 浸润等病理 改变 ，且呈剂量依赖 性 ；③ AQP1蛋 白质在各 组 中表达 差异较 大，但 AQPlmRNA差异不大，提示乙酰唑胺对 AQPl的影响是在转录后 的水平上 。 【关键词】 过敏性哮喘；水通道蛋 白1；乙酰唑胺 ；白介素 5；7干扰素 Effectofacazolamideon expression ofaquaporin 1 in lung tissueofacuteallergicbronchialasthma mice TANG Shun-guang ，ZHOU Ruixiang，BEN Su—qin，Nf Song—shi． Department of Respiratory M edicine，GouyouPeople sHospital，Gaoyou 225601，China [Abstract] 0bjective Tostudytheexpressionofaquaporin一1(AQP1)inpulmonarytissuesofacute a1lergicbronchialasthma(asthma)miceand theeffectsofacetazolamide (Acetazolamide，AZ)on which expression inordertouncoverthemechanism ofasthmaandprovidenew view forthepreventionofasthma． Methods 40C57BL／6micewererandomlydividedintoA，B，C，D，E group，miceofgroupA treatedwith phosphatebuffer (Phosphatebuffersaline，PBS)asnonasthmaticgroup，and theremai