现代分子生物学技术在冰川微生物生态研究中的应用.pdfVIP

生物技术通报 · 技 术 与 方 法 · BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2009年 第 12期 现代分子生物学技术在冰川 微生物生态研究中的应用 赵龙 季秀玲 魏云林 (昆明理工大学生命科学与技术学院，昆明 650224) 摘 要 ： 研 究冰川 中微生物 的多样性对于揭示环境气候变迁，研 究生物进化 ，开发微生物资源具有重要意义，现代分子 生物学的发展为研究冰川微生物的多样性提供 了行之有效的方法。简要综述 了16SrDNA文库构建、变性梯度凝胶 电泳 、限 制性片段长度多态性和荧光原位杂交等技术的原理及在冰川微生物生态研究 中的应用现状。 关键词 ： 冰川微生物 16SrRNA基 因文库 变性梯度凝胶 电泳 荧光原位杂 交 Application ofM olecularBiologicalTechniquesin StudyingGlacierM icrobialEcology ZhaoLong JiXiuling WeiYunlin (Collegeof SciencesandTechnolog，KunmingUniversityofScienceandTechnology，Kunming650224) Abstract： Microbesarean importantcomposition ofecosystem．Itisimportantto study themicrobialdiversityand community structureinglacierinrevealingtheclimatechanges，studyingevolutionandexploitingofmicrobialresource．Themodernmolecularbiol· ogytechniquesprovideeffectivemethodstostudythemicrobialdiversityinglacier．Inthisarticle，severaltechniques，suchas16SrRNA geneclonelibrary，DGGE(denaturinggradientgelelectrophoresis，DGGE)，RFLP(restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP)， andFISH(fluorescenceinsituhybridization)weresummarized． Keywords： Glaciermicrobes 16SrRNA geneclone library DGGE FISH 冰川是一种巨大的流动固体。在高寒地区雪结 川微生物 已成为世界极端环境微生物学领域的研究 晶聚积成巨大的冰川冰 ，冰川冰在重力和压力作用 热点。 下顺山坡或谷地 向下运动 ，成为冰川。现代冰川在 1 冰川微生物的研究方法 世界各地几乎所有纬度上均有分布。地球上的冰川 以往对于冰川微 生物多样 性和群落结构 的研 大约有 2900多万平方公里 ，覆盖大陆 11％的面积。 究一直沿用传统 的分离培养技术 ，然而研究证 明 随着大气环流和每年的降雪，微生物不断沉积 自然 界 中 85％ 一99．9％ 的微生 物是不可 培养 在冰川表面 ，在冰冻和融雪过程 中进入冰隙和深冰 的 ，因此分离培养技术不 能真实反映微生物 的 川I．冰芯 的气泡 中，并在冰川I中形成 明显 的生物 组成 。20世纪 80年代末至 90年代初发展起来 的 层…。冰芯是按年代保存 的、长 时间尺度上微 生物 一 系列分子生物学技术使得我们可以摆脱对纯培 的储存库 ，记载了不 同沉积时期大气