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分类号： 　　　　　　　　 单位代码：10389 密 级： 学　　号：11017 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 福建农林大学硕士学位论文 学 科 门 类：理学 一级学科名称：生物学 二级学科名称：微生物学 研 究 方 向：微生物应用与基因工程 研 究 生： 指 导 教 师：刘波 研究员 完 成 时 间：二O一二年一月  M.S. Thesis of Fujian Agriculure and Forestry University f citrus psylla endogenous bacteria community structure and influence factors Subject Category: Science Primary Subject: Biology Secondary Subject: Microbiology Study Field: Applied Microbiology and genetic engineering Candidate: Yang Jin Xia Advisor: Prof. Dr. Liu Bo Submitted Time: April, 2013 独创性声明 本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位（毕业）论文作者亲笔签名：　　　　　　　日期：　 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅; 学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 　　　　　　　　　　　　保密，在　　年后解密可适用本授权书。　□ 　　　　　　　　　　　　不保密，本论文属于不保密。　　　　　　□ 学位（毕业）论文作者亲笔签名：　　　　　　　日期： 指导教师亲笔签名：　　　　　　　　　　　　　日期 中文摘要 Abstract 目录 第一章 绪论 1研究背景 1.1柑橘黄龙病的发生及危害 1.2柑橘黄龙病病原 1.3柑橘黄龙病的传播 2研究现状 2.1柑橘木虱研究现状 2.2昆虫内生菌研究现状 2.2.1 昆虫内共生菌及其与寄主相互关系 2.2.2 Wolbachia的研究 2.3木虱内生菌研究现状 2.4柑橘内生细菌研究现状 3研究方法与技术 3.1正交试验优化木虱内生细菌培养基 3.2 16 S rRNA 基因序列分析的应用 3.3 实时荧光定量RT-PCR技术 3.4 TaqMan探针实时荧光定量的应用 4本研究的目的和意义 5本研究的技术路线 第二章 柑橘木虱内生细菌培养基的优化和鉴定 1 引言 2材料与方法 2.1供试样品 2.2供试试剂 2.3供试仪器 2.4方法 2.4.1分离木虱内生细菌培养基的优化筛选 2.4.2柑橘木虱内生细菌的16s rDNA鉴定 2.4.3柑橘木虱细菌生理生化鉴定 3结果与分析 3.1木虱内生细菌培养基的优化筛选 3.2柑橘木虱内生细菌的16s rDNA鉴定 3.3 柑橘木虱内生细菌生理生化鉴定 4讨论 第三章 寄主不同器官和木虱内生菌的研究 1 引言 2 材料和方法 2.1材料 2.1.1供试样品 2.1.2供试试剂 2.1.3供试仪器 2.2方法 2.2.1样品的采集 2.2.2不同品种柑橘根际土壤细菌的分离 2.2.3不同品种柑橘不同器官（根、茎、叶）内生细菌的分离 2.2.4不同品种柑橘木虱内生细菌的分离 2.2.4内生细菌的16S rDNA鉴定 2.2.5不同柑橘根际土壤细菌、不同器官和木虱内生细菌的相关性分析 2.2.6数据处理 3结果与分析 3.1柑橘根际土壤、不同器官和木虱内生细菌的分离与鉴定 3.2柑橘根际土壤、不同器官和木虱内生细菌相关性关系 第四章 柑橘木虱内生菌DNA提取方法的优化 1引言 2材料和方法 2.1材料来源 2.2细菌DNA提取方法 2.3 DNA浓度和纯度检测 2.4 PCR反应条件 2.5 PCR产物的克隆试验 3结果与分析 3.1提取木虱内生菌DNA的检测结果 3.2浓度检测结果 3.3 PCR反应结果 3.4 PCR产物克隆结果 4讨 论 第五章 木虱内生细菌多样性及实时荧光定量检测 1