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分离分析——第二章B 色谱柱系统 Column System of Chromatography 2. 气液色谱固定液 为高分子有机化合物，在操作温度下必须呈液态，基本要求为： 对组分有良好的选择性 ：使样品中各组分能彼此分离 蒸气压低 ：减少色谱柱固定液的流失 热稳定性和润湿性好好：保证柱效 化学惰性好 ：不与组分、载体、载气发生不可逆的化学反应 凝固点低，粘度适当，成分稳定 ： 2.1 分子间作用力 各组分之所以能在色谱柱中被分离，决定于分子间作用力的大小。 作用力大的保留值大，留柱时间长，后出峰。 主要有 色散力(非极性或弱极性分子之间的一种作用力 ) 诱导力 (极性分子与非极性分子之间使非极性分子极化而产生的力) 2.1 分子间作用力 定向力(极性分子间的永久偶极矩所引起分子间的一种作用力) 氢键作用力 选择性分子间作用力的研究有很好前景。 1) 集团结构适应理论 在色谱分离中，有许多反常例子，出峰顺序与常规分子间作用力大小有违（20种典型化合物在12种固定相上201个相对保留数据中有66个与预测值不相符）。 由于分子中存在着各种集团，不同分子间的集团在电子性质及空间因素上各有不同。当它们互相适应时就能相互耦合，发生较强作用，宏观体现为后出峰。当它们不相适应时，虽有集团存在亦无这种加强作用。 换言之，分子间引力存在某种选择性。提出了选择性分子间引力理论，或称“集团结构适应理论”。 2) 选择性分子间力 2.2 固定液分类 按极性分：可根据被测物极性的大小来查阅，方便地寻找极性相似的固定液作替代品 按官能团分：便于了解固定液的类别，可由结构考虑来选择固定相 A. 按极性分类的考虑 方法： 选3根柱子：β,β’氧二丙腈，角鲨烷，待测柱 选两个评价物：苯——环己烷测相对保留值 计算相对极性： 按极性分类的考虑 计算相对极性 按20为一级分类 B. 固定液特征常数概述 以不同性质的多种物质分别考察某固定液，将得到不同结果。将这些数据按一定的规律归类，并命名为特征常数。 由Rohrschneider于1966年首先提出，后由McReynods修正。 1) 评价物及意义 2) 两种评价体系的差异 罗氏评价物：在测定时需要用到气态烃类化合物，操作麻烦。麦氏正是针对该不足而提出，现广泛采用麦氏常数。 色谱手册上有该参数，有按5种评价物数值的大小排列的，也有以五项指标值之和（或平均值）排列的。 3)部分固定液的McReynods常数值 4) 特征常数的应用 判断固定液性质(极性大小、对哪类样品保留大)。 选择替代品(常数基本相同的便可替代)。 判断峰形好坏(在某固定相上已拖尾，则在常数值大的柱上拖尾将更严重)。 判断出峰顺序(常数值大的后出峰，且两数值之比大于1.5，可认为能很好分离)。 用于合理选择固定相(根据样品中不同组分的主要性质差异，合理选择相应参数差值大的固定液)。 2.3. 固定相的优选 固定相众多，实验室不可能也没必要配全。 推荐用固定相主要有： 1) 键合固定相 以分子键的形式将固定液键合到适当的载体上，减少流失损失。 再适当胶联聚合，进一步提高性能，尤其是对毛细管柱。 主要的键和体系是以PEG系列为对象。 引入特殊基团可提高柱选择性。 2) 混合固定相 单一固定液不能满足分离需要时可考虑用混合柱。 混合模式： 混合涂 混合装 单柱串联 前两法的效果基本相近，较另一法好。 3) 混合固定相配比选择 可用窗口法求出合适的固定液比 混合固定相配比选择 4) 固定液选用原则 被分离样品为非极性物质，一般选用非极性固定液。 被分离的样品为极性物质，则一般先用极性固定液。 被分离样品为极性物质（或易被极化物质）和非极性物质的混合物，一般也选用极性固定液 4) 固定液选用原则 被分离的样品若为形成氢键的物质，一般选择极性或氢键型固定液 被分离样品为具有酸性和碱性（吡啶类）的极性物质，会产生严重拖尾，一般选用极性固定液，并加酸性或碱性减尾剂 4) 固定液选用原则 被分离样品为异构体，一般选用强极性或有特殊作用力的固定液 被分离样品为不同族的混合物，视具体情况而定，或用单一固定液，或用混合物固定液。 * 吡啶 S 质子接受体 吡啶 硝基丙烷 U 电子接受体 硝基甲烷 戊酮-2 Z 定向偶极力 丁酮 丁醇 Y 质子给予体 乙醇 苯 X 电子给予体 苯 麦氏 符号 作用情况 罗氏 510 572 368 536 322 PEG 20M 305 463 355 233 144 QF-1 43 67 45 57 17 SP-2100 43 67 45 57 17 OV-101 367 493 340 381 204 XF-1125 367 49