复方黄连素与几种抗菌药物对大肠杆菌作用效果的比较.pdfVIP

性大肠杆菌C83645的药物敏感度，本次试验选 生产 。批号 择培氟沙星、卡那霉素、黄连素、复方黄连素这四 1．1．5 黄连素、复方黄连素：海南海大实验兽药 种药物做药敏试验。 厂制备，批号 本次药敏实验采用药敏纸片扩散法进行。根 1．2 实验设计：药敏纸片扩散法 表 1 实验方案 药 物 浓 度 细菌培养皿 ，个 药敏纸片，片 卡那霉素组 2OOPPM 培氟沙星组 25OPPM 复方黄连素组 250PPM+5O0PPM 黄连素组 50OPPM 分三次进行药够实验，取效果最好的一次作为实 取新华 1号定性滤纸，用打孔器打成 6mnl 验数据记录。 直径的圆形小纸片。取若干片放入清洁干燥的青 1．3 材料准备 霉素容瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎，经过 121C lI3．1药敏片的制备 高压灭菌15—2O分钟。放在3712恒温箱中数天， 中善五露糸旗 2009年第3期(总 148期) 使完全干燥后置于阴暗干燥处存放备用，切勿受 在超净工作台上用经酒精灯灭菌的接种环 潮。将小纸片置于待测药液中浸泡过夜。 挑取适量的大肠杆菌，在冷却的普通液体培养基 1．3．2 麦康凯培养基的制备 中搅拌使菌体混人其中，将瓶口封闭，置于37cI= 取麦康凯琼脂 250g溶于 500ml蒸馏水中， 恒温中培养 l6—18个小时．此菌液用于涂抹到麦 置于广 口烧瓶中，摇匀使其充分溶解 ，用棉塞塞 康凯固体培养基上。 住瓶 口，再用报纸包好系紧。将烧瓶放人高压锅 1．4 实验操作 内12l℃高压灭菌 15—20分钟，取出即可开始倒 1．4．1 在超净工作台中。用移液枪吸取2IIll培养 平皿，准备9个经高压灭菌，直径为 90mm的培 16—18个小时的细菌混悬液移至麦康凯琼脂培 养皿，每个平皿约注入 20ml左右麦康凯琼脂培 养基上用三角玻璃涂抹，使菌液均匀致密地分布 养液，倾入后即盖好，轻轻摇动培养皿，使其中培 于平皿培养基表面。 养分布均匀，静置，待其凝固后翻转放置37℃恒 1．4．2 将镊子在酒精灯火焰上灭菌后略停，夹取浸 温培养箱培养24小时后观察是否有细菌生长， 泡于药液中的药敏纸片，取出药敏纸片待其不渗药 当无细菌生长时方可应用。 液后贴到平皿培养基表面，为了使药敏片与培养基 1．3．3 待测药液的制备 紧密相贴。可用镊子按几下药敏纸片。为了使能准 按商品药的使用治疗量的比例配制药液。以 确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿 混饮的治疗量的比例配制药液，常规剂量下卡那 培养基上；一般平皿中央贴一片，外围可等距离贴 霉素200PPM、培氟沙星250PPM、复方黄连素 若干片，各纸片中心相距应大于24ram，纸片距平 (培氟沙星+黄连素)250PPM+500PPM、黄连素 板内缘应大于 15mm，在平皿外标记药液名称以便 50