大观霉素酶联免疫吸附检测方法的建立.pdfVIP

第 35卷第 2期 兰州大学学报 (医学版) 、厂o1．35NO．2 2009年 6月 JournalofLanzhouUniversity(MedicalSciences) Jun．2009 文章编号：1000—2812(2009)02—00430·4 大观霉素酶联免疫吸附检测方法的建立 曹馨匀，张云涛，杨福军，席仲兴，张甲菊，路 东 (兰州生物制品研究所，甘肃兰州 730046) 摘 要： 目的建立大观霉素直接竞争酶联免疫吸附 (ELISA)分析方法。方法 通过大观霉素与载体蛋 白偶联 ，制备免疫原和检测抗原，用杂交瘤技术制备单克隆抗体 (mAb)，鉴定mAb的特异性，并用 于竞争ELISA检测。结果 获得3株能稳定分泌抗大观霉素 的单克隆抗体杂交瘤细胞株 ，大观霉素竞 争ELISA检测的下限为lng／mL。结论抗大观霉素的mAb具有抗原结合特异性，可用于大观霉素竞 争ELISA免疫学检测。 关键词：大观霉素；单克隆抗体；酶联免疫吸附 中图分类号：R446．61 文献标识码：A Establishmentofan enzym e-linked im munosorbent assay forspectinomycin detection CAOXin—yun，ZHANGfun—tao，YANGFu-jun，XIZhong—xin， ZHANGJia-ju．LuDong LanzhouInstituteo}BiologicalProductsILanzhou73oo46IChinq) Abstract：ObjectiveToestablishanenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)forspecti— nomycindetection．M ethodsImmunogenandantigenwerepreparedbythecouplingofspecti— nomycinandcarrierprotein，andmonoclonalantibody(mAb)waspreparedbyhybridomatech— nique．ThespecificityofthemAbwasappraisedanddetectedbycompetingELISA．Results3 hybridomacellstrainscapableofsecretinganti—spectinomycinmAbstablywereobtained．The lowestlimitofELISAforspectinomycindetectionwas1ng／mL．ConclusionAnti—spectinomycin mAbhastheantigenbindingspecificityandcanbeusedincompetingELISA ofrspectinomycin detection． Key words：spectinomycin；monoclonal；enzyme—linkedimmunosorbentassay 大观霉 素 (spectinomycin)是 1961年 由Mason 原体和大肠杆菌混合感染效果显著[2--3]，并能促 首次从壮观链霉菌 (Streptinomycesspectabilis)发 进动物生长，是 良好的动物饲料添加剂，作为兽 酵液 中发现的一种氨基糖苷类广谱抗生素…1， 药广泛应用于畜牧业 中。一些不法商贩受经济利 商品名是淋必治 (trobicin)，又称壮观霉素 facti— 益的驱使滥用抗生素，使大量抗生素残留在畜产 nospectacin)、奇放线菌素、壮观菌素等。大观霉素 品中，如果长期食用含有抗生素残留的动物源性 是由微生物Streptomycesspectabitis产生的氨基环 食品，也就相当于长期低剂量吸收抗生素，使人 醇类抗生素，能有效治疗和预防由链球菌、大肠杆 体