马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因酿酒酵母表达载体的构建.pdfVIP

青岛农业大学学报 (自然科学版) 26(4)：305～308，2009 JournalofQingdaoAgriculturalUniversity(NaturalScience) 文章编号：1674—148X(2009)04—0305—04 马铃薯卷叶病毒缺失突变 CP基因酿酒酵母 表达载体的构建 左玉玲，王晓杰，樊连梅 ，王 晶珊，郭宝太 (青岛农业大学生命科学学院，山东 青岛266109) 摘要：以重组质粒pBAD—LRCP一126为模板 ，经PCR扩增获得了PLRV缺失突变 CP基因的特异性条带。目的片 段与pYES2．1／V5一His／一TOPO的连接产物转化大肠杆菌TOP10F获得了氨苄青霉素抗性菌落，酶切与DNA测序 结果确认了酵母表达载体的正确性 ，该表达载体命名为 pYES—LRCP一126。在 30℃，酿酒酵母工程菌株 INVScl (pYES—LRCP一126)经2％半乳糖诱导培养 16h，SDS—PAGE显示蛋白图谱上有一条23kDa的诱导表达的蛋白条 带，其大小与预期的重组 cP大小相符，表明PLRV缺失突变基因在