后发性白内障兔眼囊膜中Brdu的表达及AG490对其表达的对抗作用.pdf

中文摘要 后发性白内障兔眼囊膜中BrdU的表达 及AG490对其表达的对抗作用 摘 要 目的：本试验通过在活体兔眼行白内障超声乳化术制造 家兔后发性白内障模型，并与正常家兔和应用AG490的家 兔进行对照，研究患后发性白内障的家兔晶状体囊膜中BrdU 的水平以及AG490对后发性白内障的减缓或抑制，并观察 术后不同时间AG490对兔眼的影响及此药的毒副作用。 方法： l动物及分组：将35只成年健康新西兰大白兔随机分 为3组：①对照组：1 O只(20只眼)，按不同时间段分为1天、 3天、7天、1月、2月五组，每组2只(4只眼)，于前房内注 3天、7天、1月、2月五组，每组各5只眼，；③治疗组： 25只眼(均为右眼)，行透明晶状体超声乳化术，术中前房内 术后不同时间段分为1天、3天、刁天、1月、2月五组，每 组各5只眼。各组分别在相应的时间点摘除动物眼球。 2后发性白内障模型的建立：采用透明晶状体超声乳化 术建立后发性白内障模型。 3晶状体后囊混浊情况观察：术后不同时间段充分散瞳 后裂隙灯下观察兔眼晶状体后囊混浊情况，并参照Kmger 中文摘要 等对后发性白内障的评价方法对兔眼后发性白内障进行评 价。 4药物毒性观察：①角膜：术后有无水肿、混浊。光镜 下皿染色观察有无内皮损伤。②结膜：有无充血。⑧前房： 房水混浊情况观察并对其进行分级。④视网膜：通过视网膜 电图(ERG)检查及光镜下视网膜组织观察了解药物有无视网 膜毒性。 5晶状体病理组织学观察：按分组要求与不同时间点取 标本，石蜡包埋，制成切片，经既染色，在光镜下观察囊 膜组织的病理变化。 6免疫组织化学方法检测BrdU的表达：在光学显微镜 下观察，细胞核呈棕黄色或黄色者为BrdU表达阳性。应用 高倍镜下细胞核计数对BrdU表达进行定量分析。 7结果判定：我们对阳性细胞核进行计数，计算阳性细 胞核标记指数(LI)=BrdU阳性细胞数／观察细胞总数×loo％。 结果： l一般情况：术后模型组与治疗组角膜水肿程度，结膜 充血程度，前房炎症反应情况及ERG检查差异均无显著性。 2角膜及视网膜病理组织学观察：术后模型组与治疗组 角膜内皮均在两周左右恢复正常，无显著差异。两组视网膜 均未见异常，与正常对照组无显著差异。 3晶状体病理组织学改变：对照组晶状体前囊下上皮细 胞核圆，赤道部为单层细胞，后囊膜无细胞：模型组术后1、 3天，晶状体赤道部上皮细胞多层化，后囊可见移行的细胞； 术后7天，赤道部复层上皮细胞形成向后囊扩展的细胞集落， 后囊可见成簇的上皮细胞；术后1月，前后囊粘附部位有纺 中文摘要 锤形细胞增殖，在此细胞与上皮细胞间，可见不均匀的与晶状 体囊同样着色的膜样组织；术后2月，后囊出现梭形纤维细 胞及纤维组织；治疗组术后1、3天晶状体前囊下及赤道部 均为单层上皮细胞，残留的细胞明显变性，细胞间无明显联系， 胞膜不完整，后囊膜无细胞；术后7天，赤道部上皮细胞2．3 层，后囊未见移行的细胞；术后1月，晶状体赤道部上皮细 胞多层化，后囊膜可见少量移行的细胞，但明显较对照组少； 术后2月，赤道部上皮细胞多层化，后囊膜可见少量移行的 细胞，未见梭形纤维细胞及纤维组织。 4晶状体中BrdU的表达：对照组赤道部及前囊下部有 少量BrdU表达；模型组术后1、3天，赤道部及前囊下部晶 状体上皮细胞BrdU表达明显增强且达峰值，镜下可见大量棕 黄色细胞核；术后7天，后囊可见BrdU表达，赤道部及前 囊下仍有BrdU表达，细胞核颜色深浅不一，且较前减少； 术后1、2月，BrdU仅在赤道部与前后囊粘附部位有少量表 达，2月时后囊己纤维化：治疗组术后1、3天，赤道部及前 囊下部可见棕黄色细胞核，但较模型组少；术后7天，赤道 部及前囊下仍可见棕黄色细胞核，后囊未见BrdU阳性表达； 术后1、2月，赤道部及前囊下棕黄色细胞核较前减少，后 囊可见少量BrdU表达。三组差异有显著性(PO．O1)。 结论： l兔眼透明晶状体超声乳化术后晶状体上皮细胞大量 增殖，成功建立了兔眼后发性白内