甲乙煎抗肿瘤作用机理的体内外实验研究.pdfVIP

中文摘要 甲乙煎抗肿瘤作用机理的体内外实验研究 摘 要 目的：1痈发病率高，下术l=：』J除率低，预后差，中医药 治疗”10南已积累了2F寓f门经验。根据t、}，I芡川!论及对本病的诊 治体会，参考王旭高治盯大法和秦伯未《谦斋医学讲稿》中 『|fJ厂I]约经验，我们细成了方剂甲乙煎。该方临床应用中取得 了满意的疗效。本实验的目的在1二探讨甲乙煎抗月1lj亩的作用 机，li!|【，为该方治疗肿瘤提供客观依据，进～‘步指导和扩大临 床应门]。 方法： 772l n勺增殖抑制作用 经预实验小水溶液选取1．5—50mg／111l六个终浓度，与肿瘤 纠胞共同培养72小叫后，观察甲乙煎水溶液对肿瘤细胞体外 增殖的抑制作用。 2倒置显微镜_卜观察细胞的彤态变化 后，通过倒置显微镜’|i成像，观察其大体形态变化。 3流式细胞仪定量检测纠胞凋亡率和I细胞周期 耿对数生长期的细胞，计数后以每瓶1．2×100细胞接种到 J也仪分析自}{J也 5()mg／ml，们j¨J72，J、111后lf殳取訇¨J也，待；：j{L式纠f J．锚49J，同州‘检测纠fJj也的4iq亡率。 4DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡梯形带 中文摘要 取对数生长期的细胞，计数后加入，一}J药使其终浓度为 进行琼脂糖凝胶IU泳。 5甲乙煎对荷瘤小鼠s180肉}洲内抑制作川 取40只昆明干叶I／J、鼠，无菌条件下将s180腹水瘤细胞接 种到小鼠右腋皮下，O．2ml／只(4×10’个细胞)。动物随机分为 4组，每组lO只：模型组对照组：f每天灌服生理盐水0．8m1／ 只)，化疗(环磷龇胺)组(每天腹腔注射环磷酸肢0．25ml／只， 的甲乙煎水溶液灌胃)。每日灌胃一次，共给药10大，J‘次 日处死，剥取瘤组织，称重，计算抑瘤率。 6对荷瘤小鼠免疫器’自．f内影响 同一批小鼠在处死剥取瘤组织的同时，取脾脏与胸腺称 重，讨。算脾指数、胸腺指数。 7对荷瘤小鼠生存期的影响 另取40只昆明种小鼠，无菌条件将s180腹水j断细胞接 O只： 种到小鼠腹腔内，0．2m1／只。动物随机分为4组，每组1 模型组对照组：(每天灌服生理盐水0．8ml／只)，化疗(环磷龇 胺)组(每天腹腔注射环磷酸胺0．25ml／只)，中药大、小剂量 组(分别给予409／垤，209／始的甲乙煎水溶液灌胃)。每日灌 胃一次，至自然死亡为I卜，计算生命延长率。 结果： 1甲乙煎可抑制肝癌细胞的生长，与对照组相比，除1．5 mg／ml组外，其余各浓度组均能显著抑制肝癌细胞sMMc一 772l的生长(P0．01)。并且中药的生长抑制作用呈剂量依赖 性。本实验结果显示，存一定浓度范围内中药11I乙煎能抑制 中文摘要 肿瘤细胞的生长。 2经终浓度为50mg／ml药物处理后72小时后，倒置相差 显微镜下可见到，肿瘤细胞sMMC一772l皱缩变小，从瓶壁 上脱落，周围有坏死细胞碎片，细胞的折光性减弱消失，逐 渐出现死亡。阴性对照组细胞贝占壁生长良好，细胞体积较大 呈梭形，透明，折光性好，细胞增生活跃。 72小时后，G0／G1期细胞比例增加，S期细胞比例减少，肿 瘤细胞凋亡率也增加，与对照组相比有显著性差异fP0．05)； 细胞比例减少，但与对照组相比无显著性差异(P0．05)，同时 凋亡率虽有所增加，但两者无显著性差异(PO．05)。 用72h的肿瘤细胞，检测到典型的DNA梯形条带。 5甲乙煎大、小剂量组对实体刖，瘤的抑制率分别为49％ 和30％，与阴性对照组相比较有显著性差异(P0．01)，呈剂量 依赖性。 6中药大剂量组与化疗组相比能明显提高荷瘤小鼠胸腺 指数和脾指数，与化疗组有显著性差异(P0．01)；中药小剂量 组与化疗组相比也能提高荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数，但只 有胸腺指数与化疗组之间有统计学上的显