传染性喉气管炎病毒河南株TK基因的克隆与序列分析.pdfVIP

维普资讯 第 29卷第 5期 江 西 农 业 大 学 学 报 Vo1．29．No．5 2oo7年 1O月 ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis Oct．，2007 文章编号：1000—2286(2007)05一o813—05 传染性喉气管炎病毒河南株 TK基因 的克隆与序列分析 陈红英 1,2，崔保安 ，2聿，李新生 ，张书松 ，魏战勇 1,2，崔 沛 ，金 钺 (1．河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002；2．河南省动物性食品安全重点实验室 ，河南 郑州 450002；3．河 南省兽医防治站 。河南 郑州 450008) 摘要 ：根据传染性喉气管炎病毒 TK基 因的核苷酸序列设计并合成一对引物 ，利用该对 引物 PCR扩增 出鸡传染 性喉气管炎病毒河南株 IL1—CG、IL1—XY及 以色列疫苗株 TK全长片段 ，并进行克隆、测序 。结果显示 3株 IL1 的 基因全长均为 1183bp，包含一个开放性 阅读框 (1092bp)，编码 363个氨基酸的多肽 ；3株 IL1 基因核苷酸序列完全一致。并与 GenBank收录的IL1 美国632强毒株、北京 E2株 TK基因完全一致，而与山东 烟台株、英国111ome强毒株和英国216株 TK基因核苷酸同源性均为 99．5％，与其他疱疹病毒 TK基因核苷酸同 源性在 19．1％～27．2％之间。分子进化分析揭示 了各毒株 问的亲缘关系。 关键词 ：传染性喉气管炎病毒 ；TK基因；克隆；序列分析 中图分类号：$852．4*4；Q785 文献标识码：A Cloningand SequenceAnalysisofTK GeneofChicken InfectiousLaryngotracheitisVirusHenan Isolates CHEN Hong—ying1,2,CUIBao-an12．,LIXin-sheng，ZHANG Shu-song， WEIZhan—yong12,CUIPei，JIN Yue (1．CollegeofAnimalHusbandryandVeterinary，Henna AgriculturalUniversity，Zhengzhou450002， China；2．Animal FoodSafetyKeyLaboratory ，Henan Province，Zhengzhou450002，China；3．HenanProvince VeterinaryPreventivenadTreatmentStation，Zhengzhou450008，China) Abstract：Onepairofprimerswasdesigned and synthesized accordingto hte TK genenucleotide sequence(S837l4)0Ichickeninfectiouslaryngotraeheitisvirus(ILTV)．TKgenesofIL1V—XYnadILTV— CG and IⅢ vaccine were amplified by PCR using the primers．The purified PCR productswere cloned into pGEM—T Easy vectorand then sequenced．The results indicated htat all of TK gene nucleotide sequencesofhtree I唧 s~mnsare 1183bp in length．which includesone open—reading frame encoding 363 amino acid residues．TK gene nucleotide sequences ofthree IⅢ strainswere identica1．Aftereomp