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深静脉血栓患者JAK2V617F突变研究 吉林大学第一医院血管外科张阳孙喜伟王宏飞李红 摘要．目的：探讨吉林地区深静脉血栓患者JAK2V617F突变情况。方法：应用等位基因特异性 PCR(allele—specific 深静脉血栓患者中不存在或发生率很低，可能不是引起吉林地区深静脉血栓疾病的原因。 关键词深静脉血栓JAK2V617F突变 患者中的突变情况。 1对象和方法 1．1病例筛选所选50例深静脉血栓病例，由吉林大学第一医院血管外科提供。人选标准：1．不 伴有内脏静脉血栓；2．依据临床症状、体征和辅助检查可排除MPDs；3．无外伤、手术病史。其中男 23例，女27例；年龄最大82岁，最小20岁，平均60岁。病后就诊时间3h一3月。 京鼎国生物技术有限公司)提取基因组DNA。 2．应用ASP检测JAK2V617F突变 2．1等位基因特异性引物的设计 根据相关文献报道的JAK2V617F引物设计方法，从上海生工生物工程技术服务有限公司合成了 显子14基因片断3’端引物，Pnf为无突变位点的特异性引物；Pm：为含有突变位点的特异性引物。所 有引物均由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 l～ 一2l 卜————————_s21bp如——————叫 238 bp七——-1 朗p2 P 一_◆—◆ 卜278bp叫 盼阶 bpo————1 卜—————叫452 PhGATCTCCATⅣrrCCAGGCTrACACA P2：CCTCAGAACGlTrGATGGCA Pnf．AGCAT丌GGTTTrAAATTATGGAGTATATG PCR引物 Fig．1 2．2ASP检测 2．2．1首轮PCR反应 冲液2斗l，dNTP(10mMeach)0．4斗l，5’端引物Pl和3’端引物Plr各0．2斗l， 模板DNAl斗l，H2016斗l，Taq 720C30s(28循环)；720C5min。 2．2．2巢式PCR反应 异性产物大小为230bp。 each)0．4斗l，5’ DNA聚合 端引物P2、Pnf和3’端引物P2r、Pmr各0．2pl，第一轮PCR产物O．5斗l，H2016．1斗l，Taq 3％琼脂糖凝胶电泳后，观察结果。 3结果 在50例患者中未发现JAI2V617F突变。 4讨论 JAK2激酶是一个涉及到细胞生长的信号转导通路中的酪氨酸激酶。在2005年，一些研究小组 变后抑制作用减弱，使JAK2激酶活性增强。这一发现使MPDs发病机制的研究取得了突破性的进展。 ～212— 了明确的证据。 MPDs患者具有较高的血栓形成、栓塞的危险率，而最近研究表明在3159％的非MPDs的内脏 形成、栓塞密切相关，可能成为潜在的MPDs患者的标志物。 不存在或发生率很低，可能不是引起吉林地区深静脉血栓疾病的原因。对比内脏静脉血栓患者中 形成或栓塞存在组织特异性尚待进一步研究。同时本研究收集的病例有限，还有待于收集大量标本 迸一步加以证实，为深静脉血栓患者中潜在的MPDs的基因诊断提供实验证据。 深静脉血栓形成患者血浆p一选择素的变化及临床意义 刘政侯玉芬刘明 摘要 目的：探讨P一选择素在下肢深静脉血栓形成(DVT)患者中的变化及临床意义。方法：选择 栓形成密切相关，