以高效能液相層析儀進行加味逍遙散与指標成分分析研究.docVIP

以高效能液相層析儀進行加味逍遙散的指標成分分析研究 Analitical Study of the Marker Substances in Chia-wei-hsiao-yao-san by High Performance Liquid Chromatography 黃明星* 姜仁章** Ming-Hsing Huang* Ren-Chang Jiang** *嘉南藥理科技大學生活應用與保健系 **嘉南藥理科技大學醫藥化學系 *Departmaent of Applied Life Sicence and Health, Chia-Nan University of Pharmacy and Suience **Department of Applied Chemistry, Chia-Nan University of Pharmacy and Science 摘 要 有鑑於衛生署對於中藥製劑的管制，本研究的目的擬開發加味逍遙散製劑的簡易分析方法，以符合衛生署的規範。利用逆相 HPLC 分析方法，沖提系統之流動相(A) 為30 mM KH2PO4 及 5% H3PO4 (pH 2.5)，流動相(B) 為 H2O/CH3CN = 15/85 (V/V)，流動相(A)的比率自100%至35%梯度沖提。分離管柱為COSMOSIL 5C18-MS，偵測波長在 230 nm。結果可在 90 分鐘內，成功地分離geniposide、albiflorin、paeoniflorin、glycyrrhizin、cinnamic acid與paeonol等6個指標成分，並於方劑萃取液中進行各成分的定量。 關鍵字：加味逍遙散 ABSTRACT An HPLC method of the marker substances in Chia-wei-hsiao-yao-san was established. It contains albiflorin, paeonol, paeoniflorin, geniposide, glycyrrhizin and cinnamic acid. The RP-LC method was carried out within 90 minutes by using cosmosil C18-MS column and a gradient solvent system of phosphate and acetonitrile at 230 nm. The effects of phosphate concentration, pH value and organic modifier concentration of the mobile phase on the separation of the analytes were also studied. 壹、前　言 加味逍遙散是由當歸（3.0）、白芍（3.0）、白朮（3.0）、茯苓（3.0）、柴胡（3.0）、牡丹皮（2.0）、山梔子（2.0）、炙甘草（2.0）、生薑（1.0）及薄荷（1.0）等十種藥材組成之著名中藥複方1。此方出自宋代醫典太平惠民和劑局方與明朝診療全書證治準繩，主治婦人病，有疏肝解鬱功能，現為中醫院與診所的最常用藥之一2 ,3。由於傳統中藥在臨床診療上往往有其獨到之處，並非西藥所能完全取代，在亞洲人用藥中佔有相當高的比率，而且在免煎煮的中藥科學製劑（或濃縮中藥）上市之後，使得中藥在服用上又更為方便。然而中藥的處理方式不夠科學，常為人所詬病。為確保中藥的品質水準，建立一套藥物品管之分析方法成為刻不容緩的課題4。 1985年日本Ministry of Health and Welfar規定所有申請核准註冊上市的濃縮中藥必須提供二種或二種以上化學指標成份之定量分析結果。我國衛生署亦於民國89年公告，GMP中藥廠自九十年元月起，申請包括加味逍遙散等十方濃縮製劑均需訂定成分含量規格，以作為品質保證的標準，再逐步擴展至全部之製劑。 目前對中藥的分析是以高效能液相層析為主5,6，要建立完善的藥物品管制度，做好中藥的品質評估及把關7，必須開發出穩定的分析方法，並將其標準化及簡易化。本研究基於上述藥物主管機關規範的基本精神，並考量目前業界實施中藥複方品管的可行性，開發一簡便分析方法，同時定量加味逍遙散中的geniposide (1)、albiflorin (2)、paeoniflorin (3)、glycyrrhizin (4) 、cinnamic acid (5)與paeonol (6)等化學指標成分（其結構如圖1），並應用於市售的加味逍遙散藥材及其科學中藥複方。 貳、材料與方法 實驗藥品 本研究使用的標準品geniposide （1）