“二至丸”的抗骨质疏松活性研究.pdfVIP

全国第三届药用植物化学与中药新药研发技术创新研讨会 “二至丸的抗骨质疏松活性研究宰 2 林雄浩L2吴岩斌‘吴锦忠L (1福建中西医结合研究院，福州，350108； 2福建中医药大学药学院) 摘要：目的：为了阐明二至丸抗骨质疏松活性的物质基础。方法：采用体外活性实验，比较 二至丸(女贞子：墨旱莲=1：1)与单味药的抗骨质疏松活性；HPLC指纹图谱表征抗骨质疏松有效部位 的化学成分。结果：女贞子、墨旱莲、二至丸乙醇提取物对成骨细胞的增殖和碱性磷酸酶活性均有 一定的作用，与对照组比较，三者均有显著作用(pO．01)，其中二至丸乙醇提取物的促增殖作用最 强，碱性磷酸酶活性以女贞子乙醇提取物作用最强。通过与单味药的HPLC色谱指纹图谱进行比较 分析，表征二至丸乙醇提取物化学成分来源。结论：二至丸抗骨质疏松活性物质为三萜酸，主要来 自女贞子中的三萜酸。 关键词：二至丸；抗骨质疏松；活性比较；有效部位表征；总三萜酸 中医理论认为肾藏精而主髓，髓居骨中，骨又赖髓养，肾精充足，则骨髓生化有源，骨得到髓 的充分滋养而坚固有力，如果肾精虚少，骨髓化源不足，不能养骨，则骨枯不坚，引发骨质疏松。 二至丸出自明代《医便》，具有益肝肾、补阴血、乌须发之功，是一滋补肾阴的名方。临床用于治 疗肝肾阴虚，眩晕耳呜，咽干鼻燥，腰膝酸痛等…。虽然所治疾病种类甚多，但是真正与其传统应 用有明确相关性的研究很少，临床疗效定位不明确，也未能确切阐明其抗骨质疏松活性的物质基础， 致使二至丸的传统药效没有得到充分发挥，且至今有关二至丸抗骨质疏松方面仅现作者的研究报道 【2】 o 防治骨质疏松的化学药物较多，如雌激素、钙制剂和双磷酸盐类等，但临床疗效并不理想，且 有一定的副作用，如雌激素有诱发子宫内膜癌及乳腺癌的危险，使其临床应用受到限制。”1。因此， 开发疗效确切、副作用小的抗骨质疏松创新中药具有重要意义。 1材料与仪器 Ll材料 1．1．1成骨细胞 成骨细胞为原代培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞。新生SD大鼠为福建医科大学实验动物中心 提供。 1．1．2药材 女贞子和墨旱莲药材为2008年7月购自于福建天人药业有限公司，并由福建中医药大学药学 lucidum 院杨成梓教授鉴定，分别为本犀科植物Ligustrumhit的干燥成熟果实和菊科植物Eclipta L的干燥地上部分。二至丸为女贞子和墨早莲分别粉碎，过80目筛，按重量比1：1配伍； prostrata 另按《中华人民共和国药典》(2005年版)制做中成药二至丸(未添加蜂蜜)。 1．1．3试剂 modified medium)培养基 胎牛血清、l型胶原酶、胰蛋白酶和DMEM(Dulbecco’SEagle’S 磷酸二钠、PBS(0．Olg磷酸盐缓冲液)所用试剂、乙醇、甲醇和磷酸等均为分析纯；国产色谱用乙睛、 甲醇、乙醇等均为色谱纯。 木犀草素标准品(纯度98％)购自成都曼斯特生物科技有限公司；齐墩果酸对照品(批号 生物制品检定所。 1．2仪器 ’基金项目：福建省高校中西医结合基础重点实验室开发课题基金·陈可冀中西医结合发展基金 (Ckj2008014，zxy2008010) 作者简介：林雄浩(1984．)，男，在读硕士生。研究方向：复方药效物质基础研究。 通讯作者：吴锦忠(1965-)，男，教授，博士生导师。Tel：0591-2286161 1,E-mail：jinzhong巧@126．conl 204 全国第三届药用植物化学与中药新药研发技术创新研讨会 1 微镜(上海蔡康光学仪器厂)。Waters高效液相色谱仪(Waters600Controler，Waters600 Pump， W