抗坏血酸衍生物对质粒DNA氧化损伤：关于抗坏血酸构效关系与其对质粒DNA氧化损伤能力初步.pdfVIP

抗坏血酸衍生物对质粒 DNA 的氧化损伤：关于抗坏血 酸的构效关系与其对质粒 DNA 的氧化 损伤能力的初步研究 a b c c* a* 刘培岩 ，韦曦 ，蒋宁，林宏辉 ，余孝其 a 四川大学化学学院，绿色化学与技术教育部重点实验室，成都 610064 b 中山大学光华口腔医学院附属口腔医院， 广州 510055 c 四川大学生命科学学院，成都 610064 摘 要：为了研究抗坏血酸氧化损伤质粒 DNA 的损伤机理，我们设计并合成了一系列不同 羟基被封闭的抗坏血酸衍生物，研究了其对质粒 DNA pUC19 的氧化损伤作用。结果表明： 分子中包含有未被封闭的 2-OH 和 3-OH 的衍生物，很好的保留了抗坏血酸氧化损伤质粒 DNA 的能力；2-OH 和 3-OH 之一被封闭的衍生物氧化损伤的能力被大大地削弱；而那些 2-OH 和 3-OH 都被封闭的衍生物，几乎完全丧失了氧化损伤质粒 DNA 的能力。本文还测定了这些衍 生物产生的羟基自由基的量，得到的结果与电泳实验基本吻合。据此推断，2-OH 和 3-OH是 抗坏血酸氧化损伤质粒 DNA 的主要活性位点。 关键词：抗坏血酸衍生物，羟基自由基，质粒 DNA，氧化损伤 1 引言 ⋅ 1~3 在生命体系中，DNA是活性氧进攻的目标，尤其是羟基自由基( OH) 。活 性氧的进攻，会导致DNA 的损伤，包括单链损伤、双链损伤、释放自由碱基以 4~7 及戊糖环的损伤等。DNA 的损伤会导致生物体的老化、癌变等多种病变 。 关于Fenton反应和类Fenton反应体系导致DNA氧化损伤的研究，已经有很多 相关报道了8~12 。这些报道中，最常见的自由基是羟基自由基。由于抗坏血酸本 身具有的重要的生理作用，所以抗坏血酸-过渡金属离子这一体系引起了我们的 兴趣。众所周知，抗坏血酸是一个重要的抗氧化剂，可以直接清除活性氧，或者 通过再生其它抗氧化剂间接地清除人体内的活性氧1 。但是，在某些过渡金属离 子存在等特定条件下，抗坏血酸也会表现出氧化剂的性质，损伤核酸等生物大分 13~16 子 。 抗坏血酸分子中，存在四个羟基官能团，其中两个是烯醇。我们试图了解 的一个重要问题是，在氧化损伤质粒DNA 的过程中，究竟是哪个或哪些羟基官 －1－ 能团是最重要的活性位点？关于抗坏血酸衍生物，已经有一些合成方面的报道。 Yamamoto等17~18合成了6-O-酰基-2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸，并研究了其产 生羟基自由基的性质。Frimee19， Schmid20和Nihro21等人也合成了一系列抗坏血 酸衍生物，并且研究了它们抑止脂质过氧化物等方面的生理性质。在这些研究里， 大多数都表明抗坏血酸分子中的两个烯醇羟基在氧化损伤质粒DNA 的过程中， 有重要作用。然而目前还没有针对抗坏血酸分子中不同羟基被封闭的系列衍生 物，对质粒DNA氧化损伤作用的对比这一方面的研究见诸报道。有鉴于此，本 文设计并合成了一系列用简单烷基封闭了不同羟基的抗坏血酸衍生物，随后用这 些衍生物进行对DNA 的损伤实验和羟基自由基的测定，研究了抗坏血酸分子中 各个羟基对质粒DNA氧化损伤作用分别的贡献，初步研究了抗坏血酸对质粒 DNA氧化损伤能力的构效关系。 2 结果与讨论 2.1 抗坏血酸衍生物的合成 HO