复生康胶囊微生物限度检查法方法验证.pdfVIP

第26卷第l期 长 春 中 医 药 大 学 学 报 Vo1．26 2010年2月 JournalofChm~gchtm UniversityofTraditionalChineseMedicine 2．20l0 复生康胶囊微生物限度检查法方法验证 颜栋林，李 萍。兰 茜 (南宁食品药品检验所，广西 南宁530001) 摘 要：目的 建立复生康胶囊微生物限度检查方法。方法 以3株细菌、2株真菌对复生康胶囊进行微生 物限度检查方法的验证试验。结果 采用常规法大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉的回收率试验均高于70％，枯 草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌采用培养基稀释法(O．5mL／．1~)的 收率达到70％以上，控制菌采用常规法进行 检验，可检出大肠埃希茵。结论 经验证复生康胶囊微生物限度检查法应采用培养基稀释法检查细菌；常规法 检查霉菌、酵母茵和控制茵。 关键词：复生康胶囊；微生物限度；方法验证；回收率；培养基稀释法；常规法 中图分类号：R282 文献标志码 ：A 文章编号：1007—4813(2010)01—0131—02 复生康胶囊主要成分为蒲葵子、喜树果、莪术、柴 养物用0．9％无菌氯化钠溶液制备成每 1—nL含菌数 胡、绞股蓝、香菇、黄芪、甘草、磷酸氢钙_l_3j。具有活 为50～100cfu／mL的菌悬液，备用；取经25℃培养24 血化瘀、健脾消积功效，用于 胃癌、肝癌的治疗，能增 — 48h的白色念珠菌液体培养物用0．9％无菌氯化钠 强放疗、化疗的疗效，增强机体免疫功能，改善I临床症 溶液制备成每 1ini含菌数为50～100cfu／mL的菌悬 状。处方中的莪术、柴胡有一定的抑菌作用 引。根 液，备用；取经25c(=培养 1周的黑曲霉斜面培养物， 据其用药途径、成分和制法，按照 2005年版 《中国药 加 10mL0．9％无菌氯化钠溶液洗下霉菌孢子，吸取 典》一部附录 xⅢc微生物限度检查法_66_，应进行细 菌液用0．9％无菌氯化钠溶液制备成每 1mL含菌数 菌数、霉菌和酵母菌数测定，及控制菌大肠埃希菌检 为 50～100cfu／mL的菌悬液，备用。 查，建立微生物限度检查方法，并加以验证。 2．2 供试液的制备方法 取样品 10g，加pH7．0无 l 仪器与试药 菌氯化钠蛋 白胨缓冲液稀释至 100mL，制备成溶解 1．1 实验菌种 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501、金黄 均匀的 1：10的供试液。 色葡萄球菌 CMCC(B)26003、大肠埃希菌 CMCC(B) 常规法：取供试液 1mL注’l皿。 44102、白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉 CMCC(F) 培养基稀释法：取供试液 1mL注入 2个平皿中 98003，均由广西食品药品检验所提供。 (0．5n1L／皿)。 1．2 样 品 复生康胶囊 ：批 号：051101、060101、 2．3 回收率试验 试验组：取规定量供试液及 50～ 060102；由广西昌弘制药有限公司生产。 100CFU各试验菌，分别注入同一平皿中，立即倾注 1．3 培养基及稀释剂 营养琼脂培养基，玫瑰红钠 琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，平行制备2个平 琼脂培养基，营养 肉汤培养基，胆盐乳糖培养基 皿。细菌培养24～48h，白色念珠球菌和黑曲霉培养 (BL)，胆盐乳糖发酵培养基，乳糖发酵培养基，改 良 48～72h。 马丁培养基，改良马丁琼脂培养基，MUG培养基，曙 菌液组：取 50～100CFU各试验菌注入平皿中， 红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)，由广西食品药品检验所 立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培