夏天无注射液对大鼠坐骨神经损伤后的整合素β1表达的影响.pdfVIP

福 建 中医 学 院 学 报 2010年 2月 第 20卷 第 1期 JournalofFujianUniversityofTCM February2010，20(1) 29 夏天无注射液对大鼠坐骨神经损伤后的整合素p，表达的影响 钱长晖 ，何才姑 ，黄玉梅 ，江 澍 (福建 中医学院中西医结合系，福建 福州 350108) 关键词 ：夏天无注射液 ：坐骨神经损伤 ；整合素 13， 中图分类号：R285．5 文献标志码 ：A 文章编号：1004—5627(2010)01-0029-02 夏天无为罂粟科紫堇属延胡索亚属植物伏生 小牛血清封 闭内源性生物素后 。加兔抗大 鼠整合 紫堇 C『orydalisdecumbens(Thunb．)Pers．]的块茎 ， 素 B抗体 (1：100)，常温过夜，再加羊抗兔 IgG(1： 既往研究表明以夏天无总生物碱为主要成分 的夏 100)，37℃温箱 60min，滴加 SABC，室温 60min， 天无注射液对神经损伤具有止痛和消除神经肿胀 滴加 DAB显色液 。镜下控制着色时间。实验采用 的作用n]。但其在治疗 中的作用与整合素 13表达 PBS缓冲液替代第一抗体作阴性对照 。阳性物质 的关系未见报道。我们制作坐骨神经损伤的大鼠 呈棕色颗粒状 ．免疫组化判断应用 imageproplus图 模型 ，运用免疫组化技术，观察整合素p。在坐骨 像分析系统 ，在 400倍镜下，选取 1O个视野分别 神经的表达 。并通过夏天无注射液 的治疗 ，观察夏 计算光密度值后 ，求其平均值。 天无注射液对整合素 31表达的影响，为夏天无注 1．5 统计学处理 实验数据用 表示 。采用 射液临床治疗坐骨神经损伤提供分子机制 。 SPSS17．0统计软件进行分析 ，组间差异以单 因素 方差分析进行检验 ，PO．05为具有统计学意义。 1 材料与方法 2 结 果 1．1 实验造模 清洁级健康 SD雌性大 鼠18只， 每只体重 180~220g，随机分为 3组，每组 6只， 免疫组织化学结果 见图 1～图3。整合素 按文献[2]方法损伤其中2组大鼠的左坐骨神经 。 p主要在坐骨神经横断面的轴膜表达。正常对照 腹腔注射戊 巴比妥纳 (4omg／kg)，在大 鼠左后肢 组、损伤模型组表达不明显；夏天无注射液治疗 近中段坐骨神经处切开皮肤 。钝性分离肌 肉暴露 组整合素 p表达呈强阳性 。夏天无注射液治疗组 坐骨神经 ，距膝2．4cm处用改 良持针器钳夹神经 整合素 B 与正常组和损伤模型组 的阳性表达平 (持针器垂直于坐骨神经 ，压强 O．63kg／mm2)，持 均光密度值 比较 ，具有显著性差异 (P0．05)，见 续5rain，造成 Sed—don1I类损伤 ，钳夹处可见神 表 1 经菲薄，缝合皮肤 1针 。另 1组不作任何处理 ，作 正常对照。 1．2 治疗方法 手术 当 日即开始治疗 。夏天无注 射液 (江西天施康 中药股份有 限公司 ，批号 ： ，以相当于生药量 12g／kg体重进行腹 腔注射，每 日1次。另 l组不治疗用作损伤对照， 即损伤模型组。 1．3 取材 术后 21d取材 ．麻醉下暴露坐骨神 经，在损伤点及其远端 5mm处切断。将神经置人 4％多聚甲醛 固定 ，梯度乙醇脱水 。石蜡包埋。将神 经横切5p．m厚 ，行免疫组化观察 。 1．4 免疫组化观察 切片常规脱蜡 ，用 3％H20 图 1 正常对照组整合素 B1表达 的免疫组化染色 甲醇封闭内源性过