CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞免疫刺激作用的初步研究.pdfVIP

维普资讯 2007年 20卷6期 西 南 农 业 学 报 Vo1．20 No．6 SouthwestChinaJournalofAgnculturalSciences 1329 文章编号：1001—4829(2007)06—1329—04 CpG—ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞 免疫刺激作用的初步研究 温建新 ，李 俊 ，周 顺 ，任慧英 ，牛钟相 ，王金宝 (1．青岛农业大学动物科技学院，山东 青岛 266109；2．山东省农业科学院，山东济南 250000；3．山东农业大学动物科技学院， 山东 泰安 271018) 摘 要：为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG—ODN)，设计了9种未甲基化CpGODN不同序列，通过人 工合成，分别作用于猪外周血淋巴细胞和脾细胞 ，进行健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞体外转化试验。用 四甲基偶氪唑盐 (M_rr)比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力，通过测得的OD490值，计算出淋巴细胞增殖指数 (sI)，筛选 CpG—ODN的免疫刺激作用。结果显示：9种不同序列的CpG—ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程 度的刺激效果，其 中CpG—ODN6、CpG．ODN7刺激强度极显著。为研制DNA疫苗有效的CpG—ODN免疫佐荆奠定基础。 关键词：CpG—ODN序列；猪外周血淋巴细胞；猪脾细胞；免疫刺激作用；M_rr 中图分类号：$828 文献标识码 ：A ThepreliminarystudyonCpG-ODN sequenceswith immunostimulatoryinperipheralbloodlymphcellsand spleencellsofswine WENJian—xin ，LIJun ，ZHOU Shun ，REN Hui．ying ，NIUZhong．xiang3WANGJin．bao2 ， (1．QingdnoA culturalUniversity，ShandongQingdno266109，China；2．ShangdongAcademyofAgnculturalSciences，Shandong1．inan 250000，China；3．ShandongAgriculturalUniversity，ShandongTai’an265200，China) Abstract：Inthestudy，ninedifferentartificialunmethylatedoligodexynucleotides(CpG—ODN)sequencesbasedontheswineperipheral bloodlymphceUsandspleencellsweremadebyartificialmethodsrespectively．Theeffectof theinvitrolymphocytetransformationwasdetec— tedbyM1frassay．AccordingtothetestedOD ．thelymphcellsS1wascalculatedtostudytheimmuneeffectof CpG—ODN．Itwasshowde that thenineCpG—ODNshaddifferentextentof immunostimulatoryeffectsontheswineperipheralbloodlymphceHs．Afterelaborateanalysis，the conclusionWas drawnthattheCpG—ODN6hadthestrongestimmunostimulatoryactivityonth