片仔癀对人结肠癌细胞增殖的影响.pdfVIP

谓建 中医药 2010年 2月 第41卷 第 1期 FujianJournalofTCMFebruary2010，41(1) 片 仔 癀 对 人 结 肠 癌 细 胞 增 殖 的 影 响 魏丽慧 ，林久茂 ll2，彭 军 ，徐 伟 ，庄群川1,2赵锦燕lI2，郑 良朴 1,2，林 薇1,2 (1．福建中医学院中西医结合研究院，福建 福州 350108；2．福建中西医结合研究院，福建 福州 350108； 3．福建中医学院药学系，福建 福州 350108) 摘 要 ： 目的 为探讨片仔癀对人 结肠 癌细胞增殖的影响。 方法 分 别用 250、500、1000和 1500~g／mL 片仔癀干预体外培养人结肠癌细胞 HT-29，用倒置显微镜观察和 MTT法观察片仔癀干预 24h后对 HT一29细胞形 态、生长及增殖的影响作用。 结果 片仔 癀干预 24h后 ，当浓度 ≥500lag／mL时各组的HT一29细胞 胞质 变混浊． 细胞 多呈 圆形 ，体积缩小 ，折光性差 ，细胞悬浮、脱落而死亡；并随着剂量的增加细胞状 态越差 ，细胞数量明显较少 ；片 仔癀对 HT一29细胞的增殖有显著的抑制作用 ，与对照组比较 ，P0．01，各组 的抑帝j率分剐为 19．38％、46．37％、61．94％ 和 77．16％。 结论 片仔癀能有效地抑制HT-29细胞 的增殖，使 HT一29的细胞形态发生明显改变 ，提示其通过抑 制 结肠癌 细胞增殖起到治疗结肠癌的作用 关键词 ：片仔 癀 ；结肠癌 ；HT-29：细胞增 殖 中图分类号 ：R285．5 文献标志码 ：A 文章编号 ：1000-338X(2010)01--0056—o3 片仔癀是 由麝香、牛黄、蛇胆、三七等名贵 中药 10％热灭活胎牛血清 (FBS)的RPMI一1640培养基 中， 精制而成，为棕黄色或灰褐色，有密细纹，可见霉斑， 于 37℃、5％C0饱和湿度的细胞培养箱中培养。 气微香 ，味苦 、微甘。具有清热解毒 、活血化瘀、消肿 2．2 MTr法测定细胞增殖 取对数生长期的人结 止痛的功效。现广泛用于热毒血瘀所致急慢性病毒 肠癌细胞 HT一29，用0．25％胰酶消化并收集细胞。以 性肝炎、痈疽疔疮 、无名肿毒、跌打损伤 、肿瘤及各种 RPMI1640培养液 (含 10％FBS)制成细胞悬液 ，进行 炎症。研究表明[1]，片仔癀对许多晚期癌症患者能明 细胞计数，调整细胞密度为 l×lo5个 ／mL，接种于 显改善疼痛，缩小瘤体，延长生命 ，提高生活质量，对 96孔培养板 中，每孔 100 L，常规培养 24h，使细胞 晚期大肠癌有一定的治疗作用。但片仔癀抗肿瘤的 同步化。细胞分为片仔癀组(终质量浓度分别：250、 作用机理不详 ，未见有相关的研究报道。本文就片仔 500、1000、1500~g／mL)和空 白组 (直接加等体积 癀对人结肠癌细胞 HT一29增殖的影响进行研究，探 的培养液，与片仔癀组一样含有 1％的DMSO)，以上 讨其抗肿瘤 的作用机理。 各组均设 8个复孔。继续培养 24h，吸弃各孔中的液 1 材 料 体 ，每孔加入 O．5mg／mL的MTT溶液 100 L，37℃ 1．1 药物与细胞 片仔癀 (片剂)，漳州片仔癀药业 孵育 4h．然后 吸弃各孔中的液体 ，加入 DMSO 100 股份有限公司，规格 3 粒 ，批号 ：0908035。配制前 L／孑L，振荡混匀 ，室温放置 10min，使结 晶充分溶 用刀片刮取片仔癀 ．用50％的DMSO溶解配制成50 解并混匀 ．于全 自动酶标仪 570nm测定各组吸光度 mg／mL，于 4℃保存待用 。结肠癌细胞株 (HT一29)， 值 (即A值)，并按下列公式计