应用高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮的含量.pdfVIP

浙江预防医学2010堡第22鲞筮兰 圣hej强 ! ! ： ： · 9l- · 实验技术与质控 · 应用高效液相色谱法测定保健食品中 大豆异黄酮的含量 蒋明哲 汤鎏 王惠华 中图分类号：R115 文献标识码：B 文章编号：1007-0931(2010)03—0091-02 大豆异黄酮是一种从大豆中分离提取的植物雌 测器 。 性激素，具有抗氧化、改善心血管功能等功效uJ。 4 方法 目前发现的大豆异黄酮分为游离型的苷元和结合型 4．1 样品制备 称取含大豆异黄酮类的保健食品 的糖苷2类，其中以染料木素和大豆苷元为主要活 0．5g于 100mL容量瓶中，加 80％乙醇溶液溶解， 性成分。本实验通过研究用80％乙醇超声提取后， 超声提取 10min，加水定容至刻度，3000r／min离 用水定容，采用高效色谱法测定大豆制品类保健食 心5min，取上清液经0．45m滤膜过滤后进样。 品中大豆异黄酮含量，方法回收率高，易于操作， 4．2 色谱参数 检测器：Waters2695高效液相色 满足检测要求。 谱仪，紫外检测器。色谱柱：ODS—C18(4．6mm 材料与方法 ×250mm，5gxn)。流动相：甲醇+水 (45+55)。 流 速 ：1．0mL／min。柱 温：35℃。检 测 波 长： 1 材料 实验所用试剂均为分析纯，所用玻璃器 260nm。进样量 ：101~L。 皿均于 140c=【烘烤 4h。染料木素和大豆苷元 (Sigma公司)；甲醇 (HPLC级)；超纯水由MiHi 结 果 — Q超纯水机制得 (美国Millipore公司)。 1 标准曲线的绘制 分别称取染料木素和大豆苷 2 标准溶液的配制 元标准品，加入少量 甲醇溶解后再用40％甲醇定 2．1 染料木素标准溶液 准确称取染料木素标准 容，分别准确吸取此溶液适量，用40％甲醇配制 品，先加入少量 甲醇溶解后再用40％甲醇定容并 成不同浓度的标准溶液，进样 1OL，以浓度与峰 配制成 1．0mg／mL标准储备液，于冰箱 (4~C)中 面积作成标准曲线。其染料木素在8．0—100．0g／ 保存，使用时用40％甲醇稀释成25．0~g／mL的标 mL范围内呈线性，线性相关系数r=0．9996，回 准使用液。 归方程 Y=1．16×10—5x+0．1189；大豆苷元在 2．2 大豆苷元标准溶液 准确称取大豆苷元标准 1．0～80．0~g／mL范围内呈线性，线性相关系数r 品，先加人少量甲醇溶解后再用40％甲醇定容并 = 0．9988，回归方程Y=1．73×10～x+1．9308。2 配制成 1．0mg／mL标准储备液，于冰箱 (4℃)中 种标准物质的色谱峰，显示2种物质的峰型对称， 保存，使用时用40％甲醇稀释成25．0p,g／mL的标 分离度高。 准使用液 。 2 准确度 各取9份样品，每 3份为