鱿鱼墨多肽对DU-145细胞的早期凋亡抑制研究【毕业论文】.doc

本科毕业论文 （20 届） 鱿鱼墨多肽对DU-145细胞的早期凋亡抑制研究 目录 摘要 1 ABSTRACT 2 前言 3 1实验材料、主要器材与仪器 3 1.1 材料 3 1.2 主要器材及仪器 3 1.3 药品的配制 3 2 实验方法 4 2.1 鱿鱼墨多肽提取工艺 4 2.2 鱿鱼墨多肽脱脂提取工艺 4 2.3 鱿鱼墨多肽酸法提取正交实验 4 2.4 抗癌活性试验 4 2.4.1细胞培养 4 2.4.2细胞增殖抑制率的测定 4 2.4.3细胞形态学观察 5 3 结果与讨论 5 3.1脱脂对酸解提取鱿鱼墨多肽的影响 5 3.2正交试验及数据处理 5 3.3鱿鱼墨多肽对DU-145细胞增殖抑制作用 6 3.4鱿鱼墨多肽作用后DU-145细胞形态学变化 7 4小结 8 参考文献 8 致 谢 10 、、 [摘要] 目的：研究鱿鱼墨多肽酸法提取的工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145细胞的增殖抑制作用。方法：通过以酸的种类、料液比、酸解时间和酸解温度为因素，以酸解液的氨基氮含量为指标进行正交实验确定提取鱿鱼墨多肽的最佳酸解条件，再通过MTT法检测其对DU-145的生长抑制作用及HE染色法观察其对DU-145细胞形态学的影响。结果：酸法提取鱿鱼墨多肽最佳组合为0.01 mol/L盐酸、酸提料液比1：2、酸解时间72小时、酸解温度35℃；鱿鱼墨多肽对DU-145细胞有增殖抑制作用并能诱导DU-145细胞凋亡。结论：鱿鱼墨多肽能破坏细胞结构，诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的发生。 [关键词] 鱿鱼墨多肽； DU-145细胞；增殖抑制 Study on inhibition of early apoptosis of squid ink peptides on DU-145 cells [Abstract] To observe squid ink peptides with the different concentrations on inhibiting the cellular growth and indueing apoptosis of DU-145 cells. Methods: MTT assay was used to identify squid ink peptides on the growth inhibition of DU-145 and HE staining squid ink DU-145 peptides on the morphology of cells. Results: The squid ink peptides can remarkably inhibit the proliferationof DU-145 cells and induees the apoptosis of DU-145 cells in vitro.Conclusion: The squid ink peptides could inhibit prostate cancer DU-145 cell growth by directly damaging cellular ultrastructure and interfering. [Key words] Squid ink；Peptides；DU-145 Cells；Proliferation 前言 在欧美国家前列腺癌(prostate cancer，PCa)的发病率处于男性恶性肿瘤的第一位，死亡率仅次于肺癌，居第二位。近几年来，我国随着人口老龄化，PCa的发病率有明显上升趋势，己成为影响老年男性健康的一大疾患；虽然PCa的发病率低于欧美国家，但死亡率却远高于欧美国家。由于癌症患者长期化疗损害重要脏器，且会产生肿瘤耐药性，影响化疗效果[1-2]。因此，寻找低毒、高效的新型抗癌药物势在必行。海洋是生命的起源地，海洋环境又具有高盐、高压、低温等迥异于陆地环境的特点，许多海洋生物在这种极端环境中产生了大量不同于陆地生物的活性物质，结构新颖，如具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗衰老、增强机体免疫力等活性物质。其中抗肿瘤活性物质最为引人瞩目，已经成为全世界科学家们研究的热点。本文选取的北太平洋鱿鱼墨（Squid ink）是生活在海洋中的软体动物。在分类学上，鱿鱼是属于软体动物门，头足纲，二鳃亚纲，十腕目的动物[3]。研究鱿鱼墨囊抑制前列腺癌DU-145细胞作用为切入点，以开发鱿鱼墨中的生物活性物质，不仅提高鱿鱼加工过程中废弃物的综合利用率，为研发海洋药物开拓一个新的来源，更能促进我国远洋渔业水产品加工废弃物的高值化利用的发展[4]。 取新鲜的北太平海洋鱿鱼墨；DU-145细胞株(原购自中科院上海细胞库，由本实验室传代保存），柠檬酸中国