肿瘤多细胞球体培养及的应用.pdfVIP

维普资讯 》{褐 存 舞 铆 ；5一{ 肿瘤多细胞球体的培养及应用 ～ ／ 首都医科大学实验中心细胞室 竺 临床与实验表明，不同肿瘤甚至组织学 瘤细胞生长和分裂相，球体中心部分坏死。 上相同的肿瘤，其化学敏感性各不相同。用 球体用胰蛋白酶消化后可分离成单细胞，经 于肿瘤放疗和化疗的体外检测可免除无效治 组织培养叉可组成集落(colony)。他们采用 疗方案。Wright等首先使用组织培养技术 摇动培养方法，培养至12d形成球体。由于 研究体内实验与体外组织培养检测之间的相 球体体积较大，直径多为 1mm，故中心坏 关性l1]，证实离体的耐药性与临床耐药性之 死。1977年Emerman等将分散的乳腺癌上 间呈9O％以上正相关，离体敏感性与临床反 皮细胞培养在漂浮的胶膜上 6】，获得维持诱 应之间约为6O％正相关。体外培养应答频 导分化的多细胞球体。1989年潘琼靖等在 率与体内肿瘤反应的频率相似。 培养瓶底放置泡沫塑料 ¨J，上面覆盖定性滤 体外培养系统对肿瘤而言，除人体肿瘤 纸，高压灭菌后接种人食管癌上皮细胞株 组织原代外植体培养、细胞系单层细胞培养 (Eca】09)单细胞悬浮液(培养液为199，其中 和悬浮细胞培养之外，近年来发展了1种新 含2O％小牛血清以及 1000U／L青霉素，80 的肿瘤多细胞球体(muhicellulartumorsphe— mg／L链霉素)。培养1d可见细胞成团贴附 riod，MTS)培养系统，在放射反应检测以及 于滤纸。7～10d将滤纸拉出得到大小不等 化疗药物筛选上具有独特的优越性。MTS 的球体。球体为圆形，直径大约1rnam，大的 是由肿瘤单细胞在培养中自发聚集而成的小 球体约有几十层细胞，小的则只有几层。一 细胞团块。它是1种类似肿瘤小结节的三维 般球体可分3个区域，最外层有2～3层细胞 结构培养物，具有活体肿瘤组织的许多特点， 呈扁平状。将整个球体包围，有的球体外层不 如细胞紧密排列、延续性低氧细胞群以及异 呈扁平状。中间区域的几层细胞呈上皮状， 质性_2—1。它由于功能性细胞增生而生长， 形态不规则，具有肿瘤细胞的特征，如核与核 故存在一定数量肿瘤分化细胞。这些特征是 仁大而明显，较多的分裂相出现在外层细胞 其他体外培养系统所没有的…．在放射反应 属分化细胞，球体中心区为坏死区，与人体实 和化疗药物敏感性的关系上，更加接近人体 体瘤部分相似。以上方法虽然获得球体，但 内肿瘤的状况。这种培养系统除了做急性细 数量较少。1984年高进等将消化分散的人 胞毒分析外，还可分析较长时间作用及其反 食管癌 Eca~o9上皮细胞置培养管中 J，然后 应的情况。 放到振摇仪上，以2O次／rain连续培养 3～5 d，获得数量较多的球体。球体形态在第3天 l 肿瘤多细胞球体的培养 为实心状圆形，但在第5天就出现中心区坏 死、液化，甚至呈囊状，外观有的呈肾形。扫 体外培养肿瘤多细胞球体的方法有多 描电镜下球体表面凹凸不平，有的癌细胞表 种。1971年Sutherland等首次报告 1．使用 面附有大量绒毛或小泡状突起。细胞之间相 中国仓鼠V 肺细胞在培养液中形成三面体 互紧密连接。许三多等 1990年使用旋转摇 多细胞球体，形态学上与肿瘤小结节相似。 动培养仪 (70r／rain)培养球体_9J，他们将小 显微镜下可以看到球体的外层部分有许多肿 鼠肺腺癌 5细胞系细胞制成单细胞悬 收稿 日期}19 一l2—3O 维普资讯