重组肌肉抑制素功能分析及其对鸡肌肉发育的抑制作用.pdfVIP

生 物 化 学 与 生 物 物 理 学 报 ISSN ACTA B IOCHIM ICA et B IOPH YSICA SIN ICA 2003 , 35 ( 11) : 10 16 - 1022 CN 3 11300/ Q 重组肌肉抑制素功能分析及其 对鸡肌肉发育的抑制作用 杨 　威 　王 　琨 　陈　岩 　张 　勇 　黄 　波 　朱大海1 ( 哈尔滨工业大学分子与细胞发育生物学实验室 , 哈尔滨 15000 1 ; 1 中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室 , 北京 100005 ) ( ) β β 摘要 　　肌肉抑制素 myostatin 为 T GF 超家族成员 , 具有典型的 T GF 家族成员特有的分子结构与功能 。为了 深入阐明肌肉抑制素的作用机制 , 研究了重组肌肉抑制素蛋白对鸡胚成肌细胞和小鼠 C C 成肌细胞增殖与分化 2 12 的作用 , 同时制备了肌肉抑制素特异性抗体 。实验结果表明 , 重组肌肉抑制素对于成肌细胞的增殖过程具有极强 的抑制作用 , 主要表现为抑制细胞周期由 G1 期向 S 期的过渡 , 细胞生长速度显著变慢 ; 同时重组肌肉抑制素也 抑制成肌细胞分化为多核的融合肌管细胞 , 抑制肌肉分化标志 myogenin 和 M HC 的表达 。由重组蛋白质制备的抗 体能够特异性地识别人 、小鼠、大鼠和鸡肌肉组织的内源肌肉抑制素 。此外 , 通过免疫荧光技术还证实 , 肌肉抑 制素主要定位于胞液中。 关键词 　　肌肉抑制素 ; 细胞增殖 ; 分化 ; 抗体制备 ; 细胞定位 ( ) 　　在肌肉发生 myogenesis 过程中 , 多种肌肉调 素抑制成肌细胞的增殖是通过上调细胞周期素依赖 ( ) 控因子 myogenic regulatory factor s , MRFs 的时空 性蛋白激酶 CD K2 的抑制因子 p2 1 来实现的 , 从而 ( ) 特异性表达决定着成肌细胞 myoblast 的增殖与分 引起 CD K2 活性下 降 , 而影 响成视 网膜细胞瘤 ( ) ( ) 化等重要生物学活动 。肌肉抑制素 myo st atin 为近 retinoblastoma , Rb 蛋白的磷酸化状态 , 最终抑制 β ( ) [9 ] 年来发现的骨骼肌特异性抑制因子 , 属于 T GF 超 细胞周期从 G 期转入到 S 期 DNA 合成期 。同 1 家族成员之一 , 又名生长分化因子 8 (growt h and 时 , 人们也发现肌肉抑制素还具有抑制肌细胞分化 differentiation factor 8 , GD F8