血流感染病原菌AmpC酶及相关耐药机制的初步研究.pdfVIP

上 海 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) JournalofShanghaiJiaotongUniversity(MedicalScience) V01．3ONo．2Feb．20lO 文章编号：1674—8115(2010)02—0204—04 ·论 著 · 血流感染病原菌 AmpC酶及相关耐药机制的初步研究 侯伟伟 。 蒋燕群 (上海交通大学 第六人 民医院检验科 ，上海 200233) 摘 要 ： 日曲 了解血流感染病原菌中产 AmpCp一内酰胺酶 (简称 AmpC酶)菌株的分布情况和临床病例特点，并对相关基 因 ampC和 ampD进行初步研究。方法 收集2006年 1月--2008年9月血流感染革兰阴性菌 181株，分别采用头孢西丁初筛试验 和三维试验筛选产 AmpC酶菌株和高产 AmpC酶菌株 ；对初筛试验阳性相关临床病例进行回顾性分析。同时对初筛试验阳性菌 株 ampC、ampD基 因PCR扩增、测序和比对 ，Rep—PCR分析ampC阳性菌株基 因型。结果 181株病原菌 中头孢西丁初筛试验法 检出产 AmpC酶 39株 ，概率为21．5％(39／181)；三维试验法检 出高产 AmpC酶菌株 的概率为43．6％ (17／39)。PCR结果显示 ampC和 ampD基因阳性率分别为41％(16／39)和56．4％(22／39)。对 l6株ampC阳性菌进行基因测序 ，与 GenBank相应 ampC 核酸序列比对发现同源性达 98％～100％；2株阴沟肠杆菌 ampD基因的测序发现在 ampD基因羧基端存在可疑的突变位点。 结论 本研究相关败血症患者血流耐药病原菌感染主要源 自院内感染。在产 AmpC酶的血流病原菌 中，ampC基因突变比较少见， 而阴沟肠杆菌ampD基因突变发生率比较高，且ampD蛋白羧基末端氨基酸的缺失或替代可能与AmpC酶去阻遏表达高度相关。 关键词 ：AmpC13-内酰胺酶 ；头孢西丁初筛试验 ；三维试验 ；ampD 中图分类号 ：R378 文献标志码 ：A PreliminarystudyonAmpCB-lactamaseandrelateddrug-resistantmechanism of pathogenicbacteria in blood stream HOUWei-wei，JIANGYan—qun (DepartmentofClinicalLaboratory，TheSixthPeoplesHospital，ShanghaifiaotongUniversity,Shanghai200233，China) Abstract：Objective ToinvestigatethecharacteristicsofstrainsofAmpCB—lactamase(AmpCenzyme)productionin pathogenicbacteriainblood stream and clinicalpresentationsofthecases，and studytherelatedampC andampD genes． M ethods Onehundredandeighty—onestrainsofgram negativebacillusinbloodstream werecollected，Cefoxitin screening testand three-dimensionaltestwereperformed forscreeningofstrainsofAmpC enzyme，production and thoseofAmpC enzymehyperproductionretrospectiveanalysiswascondectedinthestrainswithpositiveresults．ampCandampD genePCR amplification，sequencingand sequenceanalysisofpositive strainswereperformed，and genehomology ofampC positive strainswasanalysedbyRep—PCR． Results Among181strainsinbloodstream，