壳聚糖-铜（Ⅱ）配合物固定化青霉素G酰化酶.pdfVIP

食 品与药品 FoodandDrug 2010年第 12卷第01期 l1 壳聚糖．铜 (II)配合物固定化青霉素G酰化酶 程仕伟 ，王玉梅 ’，郑彬彬 ，步长平 (1．鲁东大学生命科学学院，山东烟台264025；2．华北制药集团，河北石家庄 050015) 摘 要：目的 壳聚糖与CuSO络合为壳聚糖铜后以高分子配位键法固定化青霉素G酰化酶，考察固定化酶的性质。方法 单因素优化固定化条件，对cu浓度、络合时间、pH、温度、加酶量进行L (4)的正交试验，获得最佳固定化条件， 并研究固定化酶的最适反应温度、pH及批次稳定性 。结果 最佳固定化条件为：壳聚糖直接与cu络合制备壳聚糖铜载 体，cu浓度／0．1gomL。。，络合时间16h；载体0．3g，酶量1mL，pH4．9，温度30℃，固定化25h。最高固定化酶活性为65 U／g湿载体，固定化酶最适反应温度60℃，最适pH9．0，固定化酶具有较好的保存稳定性。结论 壳聚糖一铜 (ID 配合物固 定化青霉素G酰化酶的活性高，具有一定的应用潜力。 关键词：壳聚糖铜；固定化：青霉素G酰化酶 中图分类号：Q814．2 文献标识码：A 文章编号：1672-979X (2010)01-0011—05 ImmobilizationofPenicillinGAcylasewithChitosan．Cu CHENG Shi—wei，WANGYu．mei，ZHENGBin—bin2BU Chang-ping ， (1．SchoolofLifeSciences，LudongUniversity,Yantai264025，China；2．NorthChinaPharmaceuticalGroupCD ．， Shjiiazhuang050015，China) Abstract：ObjectiveToinvestigatethecatalyzedpropertyofpenicillinGacylase(PGA)immobilizedwith coordinatedchitosan—Cu ．MethodsTheoptimizationoftheimmobilizedconditionswasperformedbyanorthogonal test[L16(4)】withfivefactorsofCu concentration，complexationtime，pH，temperatureandenzymevolume． Theoptimum temperature，pH andstabilityofbatchofimmobilizedenzymeweresutdied．Results Theoptimum conditionsobtainedfortheenzymeimmobilizationwereasfollows：thepreparationofchitosan．Cu carrierwiht htedirectcomplexationofchitosanpowderandcopperion，0．1g／mLCu ，complexationtimeof16h；hteratioof chitosan—Cu toenzymeof3：10(g／mL)inthetotalsystem of10mlwithpH4．9at30。Cfor25h．Thehighest activityofimmobilizedenzymewas65U ／gwetcarrier．Theoptimum pH ofhteimmobilizedenzymewas9．0and theoptimum temperautrewas60℃．Besides．hteimmobilizedPGAhadgoodstoragestability．Conclusion The PGA immobilizedwithchitosan—Cu hashighactivityandcanbepotentiallyusedasanindustrialbiocatalyst． KeyWords：chitosan—Cu ；immobilization；p