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家族性淀粉样多发性神经性损害转甲状腺素蛋白的化学修饰_医学论文 家族性淀粉样多发性神经性损害转甲状腺素蛋白的化学修饰_医学论文 作者：赵辉，刘金平，郑芳，刘晓春，李新，宋佳音，孙续国【摘要】 目的： 建立一种分析血浆脂蛋白存有转甲状腺素（TTR）蛋白化学修饰的方法. 方法： 利用PCR方法诊断家族性多发性神经性损害（FAP）患者基因突变位点. 密度梯度超速离心法分离正常健康人和FAP患者血浆脂蛋白. 利用水晶震荡子分子之间亲和仪，分析TTR蛋白与脂蛋白之间分子亲和性. ELISA方法测定血浆脂蛋白TTR浓度. 用MALDITOFMS方法比较血浆与脂蛋白含有TTR蛋白的化学修饰程度. 结果： PCR方法诊断FAP患者TTR蛋白基因突变位点.分析正常人血清TTR与脂蛋白具有亲和性；正常人血浆脂蛋白TTR蛋白含有TTR浓度与FAP患者之间无明显差别. FAP ATTR Val30Met杂合子患者血浆以及脂蛋白中含有TTR蛋白，分子质量发现4个主要TTR蛋白峰. 结论： MALDITOFMS方法能够分析血浆、血浆脂蛋白中含有TTR蛋白的化学修饰. 【关键词】 脂蛋白类；转甲状腺素蛋白；淀粉样神经性病，家族性；化学修饰 　　【Abstract】 AIM: To establish a method for analysis of transthyretin(TTR) modification in plasma. METHODS： TTR gene mutation was identified in familial amyloidotic polyneuropathy(FAP)patients using PCR and plasma lipoprotein was isolated from both FAP Val30Met patients and healthy volunteers using density gradient centrifugation. Affinity between TTR and plasma lipoprotein was analyzed by quartz crystal microbalance(QCM). Serum TTR level was measured in both FAP patients and healthy volunteers. TTR modification ratio between serum TTR and lipoprotein TTR was calculated in FAP patients using MALDITOFMS testing. RESULTS： The serum TTR had an affinity with plasma lipoprotein in healthy volunteers. And the levels of serum TTR were not significantly different between FAP patients and healthy volunteers. In both serum and lipoprotein, TTR was found to have four different types of modification in FAP Val30Met patients. CONCLUSION： MALDITOFMS can be used in identifying TTR modification. 　　【Keywords】 lipoproteins； transthyretin； amyloid neuropathies, familial；chemical modification 　　0引言 　　转甲状腺素(transthyretin，TTR)蛋白由127个氨基酸组成，在生理条件下4个TTR蛋白单体分子结合一个T4单体分子形成聚合体，存在于血液中参与甲状腺素的转运［1］. TTR蛋白基因发生遗传性突变以及在其他因素作用下TTR蛋白聚合体不稳定，容易分离形成单体. 立体结构发生变化的TTR单体，进一步重合形成蛋白纤维沉积于全身组织、脏器的细胞间质，引起末梢神经、自主神经感觉障碍以及全身症状为特征的综合临床症状，称为家族性多发性神经性损害(familial amyloidotic polyneuropathy，FAP)［2-3］. 我们建立一种能够分析血浆、尿液、血浆脂蛋白含有TTR蛋白化学修饰的方法，为研究化学修饰与淀粉样沉积形成提供方法保障. 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　 　　健康正常人8例，FAP患者7例，符合诊断标准，经PCR确