石蜡切片中BCL┐6抗原失活机制及修复_医学论文.docVIP

石蜡切片中BCL┐6抗原失活机制及修复_医学论文 石蜡切片中BCL┐6抗原失活机制及修复_医学论文 作者：张永清　黄高升日　赵一岭　王哲　闫庆国　郭英 【关键词】抗原修复 　　关键词:抗原修复免疫组织化学BCL-6淋巴组织增生 　　摘要:目的探讨石蜡切片中BCL-6抗原失活机制及修复的最佳方法.方法淋巴组织反应性增生11例石蜡切片分别用二乙胺四乙酸（EDTA）、柠檬酸、碳酸钠及去离子水4种与钙离子结合力不同的修复液，结合高压、微波和煮沸3种不同方法修复后，比较检出的BCL-6阳性率及强度.结果BCL-6阳性率由高至低依次为:EDTA0.73gt柠檬酸0.45（0.01）gt碳酸钠0.12（0.01），去离子水组无1例阳性.高压修复阳性率0.55gt微波修复0.28和煮沸修复0.12（0.05）.不同修复液与高压结合修复检出BCL-6阳性率及强度:EDTA与柠檬酸阳性率分别为1，0.82（Pgt0.05），高于碳酸钠组（0.36）和去离子水组（0）（0.01）.EDTA组强阳性占0.82，显著高于其他各组（0.01）.结论EDTA结合高压是修复BCL-6抗原的理想方法，钙离子的参与可能是甲醛固定后BCL-6抗原失活的原因之一. 　　Keywords:antigenretrievalimmunohistochemistryBCL-6lymphoproliferation 　　Abstract:AIMTostudytheidealmethodofretrievingtheantigenicactivityofBCL-6inparaffinsectionsandthe　possiblemechanismoftheantigenmasking.METHODSParaffin-embeddedsectionsfrom11casesoflymphoidreac-tivehyperplasiawereretrievedrespectivelybyfourretrievingsolutionswithdifferentcombiningpowerwithcalcium:ED-TA，citrate，sodiumcarbonate（SC）anddeionizedwater（DW），whichwithdifferentretrievalmethods:highpressure（HP），microwaving（MW）andstoveboiling（SB），andtheantigenicactivitiesweredetectedbyimmunohistochemistry.RESULTSThepositivepercentageinsectionsretrievedbyEDTA，citrateandSCwere0.73，0.45and0.12respective-ly.Thedifferenceamongthegroupswassignificant（0.01）thegroupofDWshowedallnegative.0.55ofHPgroupwaspositive，whichwashigherthan0.28ofMWgroupand0.15ofSBgroup（0.05and0.01）.ThepositiveincidencesofsectionsretrievedbyHPwithEDTAandHPwithcitratewere1and0.82respectively，whichwerehigherthanHPwithSC（0.36）andHPwithDW（0）（0.01）.0.82ofHPwithEDTAwasintensivepositive，thedifferenceinpositiveintensitybetweenHPwithEDTAgroupandabovementionedgroupswassignificant（0.01）.CONCLUSIONHPwithEDTAistheidealmethodforretrievingantigenicactivityofBCL-6byformalin-fixa-tive，suggestingthatcalciummaybeinvolvedintheantigenmasking. 　　0引言 　　BCL-6是位于染色体3q27原癌基因bcl-6编码的核内转录因子，由706个氨基酸组成，主要表达于淋巴组织生发中心B细胞及部分T细胞［1］.研究证实，bcl-6剔除鼠不能形成生发中心［2］，其基因调控区发生易位或（和）突变与B细胞淋巴瘤发生有关［3，4］，BCL-6表达失调可引起细胞凋亡及弥漫性大B细胞淋巴瘤发生［5，6］.检测BCL-6表达有助于淋巴瘤的诊断和鉴别诊断［7］.然而