第六章微生物的遗传和变异.pptVIP

第六章  微生物的遗传和变异 基本定义 第一节 微生物的遗传 第二节 微生物的变异 第三节 基因重组 第四节 遗传工程在环境保护中的应用 第一节 微生物的遗传 经典实验 核外DNA的种类 DNA的结构与复制 DNA的变性和复性 经典试验：证明核酸是遗传信息的载体 1、转化实验：1928年，Griffith等分别用肺炎R型/S型双球菌感染小鼠，得知S型菌株具有感染能力； 利用热死的S菌株与R型菌株同时感染小鼠，发现小鼠染病，得出S型肺炎双球菌可以将具有遗传功能的物质传递给R型肺炎双球菌。 1944年，在以上基础上用将S型菌的各组分分别与R型共同培养，得出结论——S型菌传递给R型菌的不是性状本身而是遗传物质基础。 DNA的结构与复制 DNA的结构：双螺旋结构，每条链都由脱氧核糖、磷酸交替排列构成，其中夹有碱基。 DNA的复制 DNA的变性和复性 核酸变性：是指核酸双螺旋结构解开，氢键断裂，但并不涉及核苷酸间磷酸二酯键的断裂。 DNA的复性：变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分离的链重新缔合而形成双螺旋结构，这一过程又称为退火。复性后的DNA可基本恢复一系列的理化性质，生物学活性也可得到部分恢复。 RNA：核糖核酸，与DNA相似，只是以核糖代替脱氧核糖，以尿嘧啶代替胸腺嘧啶。RNA有tRNA、rRNA、mRNA及反义RNA，由DNA转录而成。 第二节 微生物的变异 基因突变的定义 突变率 突变的类型 变异的实质——基因突变 基因突变：变异的一种，指生物体内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化（10－6－10－9） 突变的类型 自发突变 定义：指某微生物在自然条件下，没有人工参与而发生的基因突变 诱发突变 定义：利用物理的或化学的因素处理微生物群体，促使少数几个细胞的DNA分子结构发生变化，引起微生物的遗传性状发生突变。 诱变剂：凡能提高突变率的因素都称为诱发因素或诱变剂 物理诱变 紫外线对DNA的损伤及其修复 紫外线的主要作用是使用链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体(双链扭曲变形，不能正常配对) 化学诱变 直接作用：亚硝酸等氧化剂及硫酸二乙脂、甲基硫酸乙脂等烷化剂，可与一个或多个核苷酸碱基起化学作用，引起变异。A→H≈G C→U≈T G→X 间接作用：引起置换的诱变剂5－溴尿嘧啶（5－BU）、5－氨基尿嘧啶（5-AU）、8－N鸟嘌呤（8-NG）等为碱基结构类似物，掺入到DNA分子中，使DNA无意义，因此可引起变异。 第三节 基因重组 基因重组 杂交 转化 转导 转化 转化：受体菌接受供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象。脱氧核糖核酸酶可以抑制转化作用。 感受态：在一个生长过程中的细菌培养物中只有某一阶段中的细菌才能作为可转化的受体。能接受转化的这一生理状态称为感受态。 转导 转导：通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换和整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。（重组的细胞称为转导子） 第四节 遗传工程技术在环境保护中的应用 遗传工程技术在环境保护中的作用 基因工程在环境保护中的应用 PCR技术在环境保护中的应用 质粒育种的应用 多功能超级细菌的构建：将降解芳烃、多环芳烃等的质粒转移到能降解脂烃的假单胞菌体内，变可得到能降解三种烃类的超级菌。 降解抗汞质粒菌的构建:将降解辛烷、乙烷、癸烷功能的OCT质粒和抗汞质粒MER同时转移到对20mg/L汞敏感的恶臭假单胞菌体内，使其转变为抗50－70mg/L汞，同时具有分解辛烷等烷烃。 基因工程在环境保护中的应用 基因工程：用人工方法将所需要的某一供体微生物的DNA提取出来，在离体条件下用限制性内切酶将离体DNA切割成带有目的基因的DNA片断（每一片断平均长度为几千个核苷酸）把它与载体DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更容易生长繁殖的受体细胞中，从而获得新的物种。 PCR技术在环境保护中的应用 PCR：DNA多聚酶链式反应，DNA体外扩增的技术。 PCR检测速度快，只需5－6h就可出结果。 普遍转导（generalized transduction） 利用完全缺陷噬菌体来完成 完全普遍转导：外源DNA在受体细胞中与核染色体整合，随其一起复制、表达。 流产普遍转导：外源DNA在受体菌中既不进行交换、整合和复制，也不迅速消失而仅进行转录、转译和性状表达。 局限转导（restricted transduction） 部分缺陷噬菌体，转导子不稳定。 普遍性转普遍性转导导 流产普遍转导 溶源转变（lysogenic coversion） 不同于转导，只是由于溶源而被赋予新的性状（不携带外源基因）噬菌体是完整的；是