酶工程教案.docVIP

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酶工程教案.doc

酶工程简介 酶工程(enzyme engineering)是在1971年第一届国际酶工程会议上才得到命名的一项新技术。酶工程主要研究酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰和改造以及在工农业、医药卫生和理论研究等方面的应用。 根据研究和解决问题的手段不同将酶工程分为化学酶工程和生物酶工程。 第一章 酶学概论(Enzyme) 新陈代谢是生命活动的基础,是生命活动最重要的特征。而构成新陈代谢的许多复杂而有规律的物质变化和能量变化,都是在酶催化 下进行的。生命的生长发育、繁殖、遗传、运动、神经传导等生命活动都与酶的催化过程紧密相关,可以说,没有酶的参与,生命活动一 刻也不能进行。 第一节 酶的一般概念 一、酶的概念及化学本质 (一)?? 酶的概念:酶是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子,包括蛋白质及核酸,又称为生物催化剂。 (二)?? 酶的化学本质: 绝大多数酶是蛋白质,少数是核酸RNA,后者称为核酶。 ?? 根据酶的组成成分,酶可分为:单成分酶(单纯酶)、多成分酶(复合酶) 单纯酶(simple enzyme)是基本组成单位仅为氨基酸的一类酶。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脲酶、消化道蛋白酶、淀粉酶、酯酶、核糖核酸酶等均属此列。 复合酶(conjugated enzyme)的催化活性,除蛋白质部分(酶蛋白apoenzyme)外,还需要非蛋白质的物质,即所谓酶的辅助因子(cofactors),两者结合成的复合物称作全酶(holoenzyme),即: 全酶 辅助因子 (结合蛋白质) () (非蛋白质部分) 酶的辅助因子可以是金属离子,也可以是小分子有机化合物。常见酶含有的金属离子有K+、Na+、Mg2+、Cu2+、(或Cu+)、Zn2+和Fe2+(或Fe3+)等。它们或者是酶活性的组成部分;或者是连接底物和酶分子的桥梁;或者在稳定酶蛋白分子构象方面所必需。小分子有机化合物是一些稳定的小分子物质,其主要作用是在反应中传递电子、质子或一些基团,常可按其与酶蛋白结合的紧密程度不同分成辅酶和辅基两大类。辅酶(coenzyme)与酶蛋白结合疏松,可以用透析或超滤方法除去;辅基(prosthetic group)与酶蛋白结合紧密,不易用透析或超滤方法除去,辅酶和辅基的差别仅仅是它们与酶蛋白结合的牢固程度不同,而无严格的界限。 大多数维生素(特别是B族维生素)是组成许多酶的辅酶或辅基的成分。它们的化学结构式见下章维生素。体内酶的种类很多,而辅酶(基)的种类却较少,通常一种酶蛋白只能与一种辅酶结合,成为一种特异的酶,但一种辅酶往往能与不同的酶蛋白结合构成许多种特异性酶。酶蛋白在酶促反应中主要起识别底物的作用,酶促反应的特异性、高效率以及酶对一些理化因素的不稳定性均决定于酶蛋白部分。常见的辅酶,如下表所示: 辅酶形式 主要作用 所含B族维生素 硫胺素焦磷酸酯(TPP) α-酮酸氧化脱羧、酮基转换作用 硫胺素(B1) 6,8-二硫辛酸 α-酮酸氧化脱羧 硫辛酸 辅酶A(CoA) 酰基转换作用 泛酸 黄素单核苷酸(FMN) 黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD) 氢原子转移 (B2) 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+) 氢原子转移 (PP) 磷酸吡哆醛 氨基酸代谢 吡哆素(B6) 生物素 羧化作用 生物素(H) 四氢叶酸 一碳基团转移 叶酸 5-甲基钴铵素 5-脱氧腺苷钴铵素 钴胺素(B12) (二)根据酶的结构特点及分子组成形式分为: 1.单体酶 :只含一条肽链,分子量小,大多数水解酶属于此类。 2.寡聚酶: 3.多酶复合体: (三)根据酶的存在状态分为: 1.胞内酶: 2.胞外酶: 三.酶催化作用的特性 1.只能催化热力学上允许进行的反应,对于可逆反应,酶只能缩短反应达到平衡的时间,但不改变平衡常数; 2.酶也是通过降低化学反应的活化能来加快反应速度; 3.酶在反应中用量很少,反应前后数量、性质不变。 1、高度专一性: (specificity),它是指酶对所作用底物(substrate)的选择性。根据酶对底物的选择方式不同,酶的专一性分为: 1)、绝对专一性(absolute specificity):指一种酶只选择一种底物作用,如脲酶。 2)、相对专一性(relative specificity):指一种酶选择一类底物作用。根据酶选择的对象不同又分为: (bond specificity):指酶对所作用键的选择性,如脂肪酶。 ,group speicificity):指酶对所作用的键及键一侧的基团的选择性,如α-D-葡萄糖苷酶,胰蛋白酶。 3)、光学专一性(optic

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