一种简单高效的聚丙烯酰胺凝胶DNA回收方法.pdfVIP

一种简单高效的聚丙烯酰胺凝胶DNA回收方法 漆雪琳1,2 宋顺3 彭明2 李博1,2 陈新2 1海南大学农学院，海口570228; 2中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海口571101； 3中国热带农业科学院海口实验站，海口570102 摘要：笔者介绍了一种简单的聚丙烯酰胺凝胶DNA回收方法 （直取法），通过与传统煮沸法比较以证明 直取法回收聚丙烯酰胺凝胶DNA的高效性。以木薯cDNA为材料，将直取法与常规煮沸法从实验方 法、杂带污染率以及回收扩增率3个方面进行比较。实验结果表明：直取法较煮沸法简单、快速；煮沸法 的杂带污染率为59.09％，直取法为43.08％；煮沸法的平均产物量约为40ng/μL，直取法约为60ng/μL。 研究结果表明，直取法相对煮沸法简单，快速，扩增效率高，杂带污染几率小。 聚丙烯酰胺凝胶电泳；DNA回收；煮沸法；直取法；木薯 Q-3 A AKindofSimpleandEfficientDNARecoveryMethodfromPolyacrylamideGel Li Bo ChenXin QiXuelin SongShun PengMing 基金项目：973计划 “重要热带作物木薯品种改良的基础研究”(2010CB126602);国家自然科学基金 “利用改良型cDNA-AFLP技术筛选木薯抗旱相 关基因”。 第一作者简介：漆雪琳，女，1984年出生，陕西咸阳人，硕士，研究方向：生物化学与分子生物学。通信地址：571101海南省海口市龙华区学院路4号 热带生物技术研究所C401，Tel:0898E-mail:shirley_q1212@。 通讯作者：彭明，男，1956年出生，湖北武汉人，研究员，博士，研究方向：分子遗传学。通信地址：571101海南省海口市龙华区学院路4号热带生物技 术研究所C401，Tel：0898E-mail:mmpeng_2000@。 2011-03-22 2011-05-15 ·215· @@[1] 肖学珊，张清炯，邝志和，等.从凝胶中回收银染DNA条带的研究 [J].临床检验杂志,2002，20(1):24-27. @@[2] 朱玉君，樊叶杨，庄杰云.从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA 样本[J].0生物技术通报，2010，1:193-195. @@[3] HarveyM,BrissonI,GuerinSL.Asimpleapparatusforfastand inexpensiverecoveryofDNAfrompolyacrylamide gels[J]. Biotechniques,1993,14:942-948. @@[4] 秦岭，张春雷，张斌.mRNA差异显示中特异条带回收方法的改进 [J].山东农业科学，2007，6:106-107. @@[5] 周政，李敏.介绍一种高效、简单的DNA沉淀法[J].生命的化学， 1999，19(1):32. @@[6] 高传军.一种从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段的简易方法[J]. 科技信息，2009，19:6. @@[7] 史金铭，孙野青.单链DNA纯化对变性PAGE凝胶银染片段回收 效率的提高[J].生物学杂志，2009，26(5):74-76. @@[8] 李莉，贾纳提，朱昊，等.干旱胁迫下新疆野生沙生冰草的银染 mRNA差异显示分析[J].草食家畜，2010，4:26-32. @@[14]吉家敏，夏志强，王文泉，等.木薯SSR标记非变性聚丙烯酰胺凝胶 @@[9] 王晓通，连林生，邓学梅，等.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中与杂合 电泳条件的优化[J].现